本發明公開了一種血管緊張素轉換酶(ACE)抑制肽及其應用,所述肽的氨基酸序列為Gly?His?Arg(GHR)。本發明所涉及的ACE抑制肽屬于食源性降壓肽,具有分子量小、水溶性好、易吸收、低致敏性、無毒等特點。本發明可為研發高血壓治療藥物及開發具有ACE抑制作用的功能食品、保健品提供參考,具有廣泛的應用前景和研究意義。
技術領域
本發明涉及生物活性肽技術領域,尤其是涉及一種ACE抑制肽及其應用。
背景技術
高血壓是一種心血管病綜合征,是引發中風、心肌梗塞、動脈粥樣硬化、心力衰竭、慢性腎病的主要危險因素。研究表明高血壓影響到全世界約25%的成年人口,據統計,全世界每年由高血壓導致死亡的人數約占總死亡人數的12.8%。
血管緊張素轉換酶(Angiotensin converting enzyme,ACE)是一種含鋅的二肽羧肽酶,在腎素-血管緊張素系統(RAS)和激肽系統(KKS)中扮演著重要的血壓調節功能。ACE不僅可以通過水解作用將血管緊張素I轉化為具有血管收縮作用的血管緊張素II,還可將血管舒張作用的緩激肽轉變為沒有活力的緩釋肽片段,這兩種作用均可導致血管收縮,從而引起高血壓。因此ACE被認為是引起高血壓的一個重要因素。經研究發現血管緊張素轉換酶抑制劑(ACEI),能夠通過抑制或降低ACE酶活性達到降低血管緊張素II的生成,并避免激肽、緩激肽的失活,起到調節血壓的作用。
常見的ACE抑制劑藥物有卡托普利、苯那普利、依那普利、賴諾普利等,盡管這些藥物在控制血壓方面是有效的,但是臨床上顯示長期服用降壓藥,會有咳嗽、血管性水腫、頭痛等不良反應。食源性的生物活性肽具有天然、安全性高、易吸收、無副作用等特點,具有廣闊的開發和應用前景。近年來,越來越多的研究者將焦點聚集在從食物蛋白中尋找ACE抑制肽。
從食物蛋白中制備ACE抑制肽的常用方法是采用酶水解,分離純化和結構鑒定,其過程繁瑣,耗時較長,需要耗費大量的人力物資,且收率低,并且因其分段的活性測定方法容易錯過某些活性較強的單肽。因此需要尋找一種高效發現活性肽的方法,以實現大量制備。
發明內容
針對現有技術存在的上述問題,本發明提供了一種ACE抑制肽及其應用。本發明利用生物信息學的方法,借助各種在線活性肽數據庫,從牦牛膠原蛋白中篩選出一種新的ACE抑制肽,所述ACE抑制肽的氨基酸序列為Gly-His-Arg(GHR)
本發明的技術方案如下:
一種來源于牦牛膠原蛋白的ACE抑制肽,所述ACE抑制肽的氨基酸序列為Gly-His-Arg,簡稱GHR。
進一步地,所述ACE抑制肽的分子量為368.40Da。
進一步地,所述ACE抑制肽為白色粉末狀,易溶于水。所述ACE抑制肽來源于牦牛膠原蛋白。
進一步地,所述ACE抑制肽體外檢測的抑制活性IC50為0.27mg/mL。
進一步地,所述ACE抑制肽通過固相合成法化學合成,純度98%。
所述固相合成法為:
按照氨基酸序列Gly-His-Arg的特征,從C端向N端合成,先將Arg的羧基以共價鍵的形式與一個樹脂相連,然后Arg的氨基和His的羧基縮水反應,之后再添加最后一個Gly氨基酸,反應后切除樹脂,經高效液相色譜進行純化,即得到目標ACE抑制肽GHR。
進一步地,所述高效液相色譜的色譜柱型號為Kromasil C18,尺寸4.6*250mm,5μm。
進一步地,高效液相色譜進行純化時,流動相A為含有0.1%三氟乙酸的乙腈;流動相B為含有0.1%三氟乙酸的水;流速1.0mL/min,檢測波長220nm。
一種所述ACE抑制肽的應用,可用于制備降高血壓的藥物或保健品。