[發明專利]一種增強CAR-T細胞功能的培養基及其應用在審
| 申請號： | 202210522372.5 | 申請日： | 2022-05-13 |
| 公開（公告）號： | CN114736874A | 公開（公告）日： | 2022-07-12 |
| 發明（設計）人： | 錢鵬旭;朱萌;韓穎麗 | 申請（專利權）人： | 浙江大學 |
| 主分類號： | C12N5/10 | 分類號： | C12N5/10;C12N15/867;C12N15/62 |
| 代理公司： | 杭州求是專利事務所有限公司 33200 | 代理人： | 趙杭麗 |
| 地址： | 310058 浙江*** | 國省代碼： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 增強 car 細胞 功能 培養基 及其 應用 | ||
1.一種增強CAR-T細胞功能的培養基，其特征在于，包括基本培養基和SF2523，其中SF2523的使用濃度為500nm-3μM，SF2523的分子式C19H17NO5S，CAS號1174428-47-7。
2.根據權利要求1所述的培養基，其特征在于，基本培養基為：10％體積比的胎牛血清、100U/ml的青霉素、100μg/ml的鏈霉素以及200U/ml的白介素2，余量為RPMI 1640培養基。
3.根據權利要求1所述的培養基，其特征在于，SF2523的使用濃度為1μM。
4.權利要求1-3任一所述培養基在CAR-T細胞的構建及培養中應用。
5.根據權利要求4所述的應用，其特征在于，所述CAR-T細胞的構建及培養通過以下步驟實現：
(1)分離制備CAR-T細胞所需的T細胞；
(2)構建用于表達CAR基因序列的慢病毒載體，將所述慢病毒載體在轉染劑存在的條件下對步驟(1)中的T細胞轉染，制成CAR-T細胞，轉染劑為聚凝胺；
(3)對步驟(2)制備的CAR-T細胞進行培養，在培養的第1-6天使用基本培養基，在培養的第6～12天使用權利要求1～3任一所述培養基即基本培養基和SF2523。
6.根據權利要求5所述的應用，其特征在于，在培養全程所述CAR-T細胞在培養基中的濃度為1-10×105個/mL。
7.根據權利要求6所述的的應用，其特征在于，所述CAR-T細胞在培養基中的濃度為5×105個/mL。
8.根據權利要求5所述的應用，其特征在于，步驟(3)中，對CAR-T細胞培養時間12-15天，每1～3天更換一次權利要求1～3任一所述培養基。
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