[發明專利]一種人NKT細胞系及其應用

有效

• 申請號: 202210513657.2
• 申請日: 2022-05-11
• 公開（公告）號: CN115094034B
• 公開（公告）日: 2022-12-06
• 發明（設計）人: 朱學軍;黎陳鋮;劉細細;田芳;陳碧清;徐祖瓊;姜鵬君;張瑋光;楊箐
• 申請（專利權）人: 江蘇省中醫院
• 主分類號: C12N5/0783
• 分類號: C12N5/0783;A61K39/00;A61P35/00;C12R1/91
• 代理公司: 江蘇圣典律師事務所 32237
• 代理人: 肖明芳

本發明公開了一種人NKT細胞系，命名為NKT細胞系617，其保藏號為：CCTCC NO：C2022121，保藏日期為2022年5月9日。本發明的NKT細胞系617來源于一位女性NKTCL患者的外周血，此患者EBV感染呈陰性，建立的細胞系EBV鑒定亦呈陰性。該細胞系EBV陰性能長期在體外連續傳代培養，目前已在體外培養兩年余，單克隆成功，低劑量IL?2依賴可以大量擴增的人NKT細胞系，為人NKT相關研究及臨床過繼免疫治療提供新的工具實驗模型。本發明的NKT細胞系作為一種新型的抗腫瘤細胞免疫治療具有巨大的前景。

技術領域

本發明涉及人的細胞系，具體地涉及一種人NKT細胞系。

背景技術

自然殺傷T淋巴細胞(Natural Killer T cells cells，NKT細胞)是T細胞的一個特殊亞群，表達αβTCR受體(αβT細胞受體)以識別抗原并表現典型的NK細胞特征，如CD16、CD56以及顆粒酶。NKT細胞可直接識別靶細胞表面由MHCⅠ類分子CD1d提呈的脂質類抗原，或被IL-2、INF-γ等細胞因子激活，迅速產生應答。活化的NKT細胞可通過分泌穿孔素、顆粒酶或通過Fas/Fas L途徑殺傷某種腫瘤和病原體感染的靶細胞；也可通過分泌IL-4或IFN-γ誘導初始T細胞向Th1或Th2細胞分化，參與體液免疫或細胞免疫應答，增強機體抗感染和抗腫瘤作用。NKT細胞也被認為是先天免疫和適應性免疫之間的橋梁。

NKT細胞識別由β2M相關的MHCⅠ類分子CD1d呈遞的基于脂質的抗原，并分為兩大類：Ⅰ型和Ⅱ型NKT細胞。Ⅰ型NKT細胞識別原型NKT細胞脂質抗原α-半乳糖神經酰胺(α-GalCer)并表達CD1d限制性半不變的αβTCR，包含不變的α-鏈(小鼠Vα-Jα18，人Vα24-Jα18)耦合到有限的β鏈序列(小鼠Vβ8，Vβ7和Vβ2，人Vβ11)。Ⅰ型NKT細胞在小鼠中相對豐富，占大多數組織中T細胞的1％～3％，以及在肝臟T細胞中高達50％。人類Ⅰ型NKT細胞占比較低，在血液和肝臟T細胞中不到1％。人類擁有更多數量的Ⅱ型NKT細胞，他們表達不同的TCR，具有更廣泛的脂質抗原特異性。

結外自然殺傷T細胞淋巴瘤(Extranodal Natural Killer/T-cell lymphoma，NKTCL)是非霍奇金淋巴瘤的一種高度侵襲性的亞型，通常CD56⁺、胞內CD3⁺，胞內毒性標志物包括granzyme B和TIA1陽性。

2018年Cell Medica公司宣布全球首例兒童神經母細胞瘤患者已經成功接受該公司的在研的CAR-NKT療法，基于該技術平臺，通過對患者自身的NKT細胞進行基因工程改造，使其靶向GD2(一種幾乎在所有神經母細胞瘤細胞表面均有表達的分子)，結合基因工程嵌合抗原受體和IL-15的分泌，在免疫抑制腫瘤微環境下維持治療細胞的活性。臨床前研究中已經顯示，這種工程化設計可以增加CAR-NKT細胞的持久性并改善它們在免疫抑制性腫瘤微環境中的有效性，為實現對多數實體瘤的有效控制帶來希望。NKT細胞作為一種新型的抗癌細胞免疫治療具有巨大的前景。