[發明專利]MdLOG基因啟動子缺失片段及其在檢測蘋果屬植物耐鹽性中的應用

在審

• 申請號: 202210513302.3
• 申請日: 2022-05-12
• 公開（公告）號: CN114836566A
• 公開（公告）日: 2022-08-02
• 發明（設計）人: 馮軼;呂佳紅;張萌;吳月;高敏;李潔;彭夢群;吳欣怡;朱沁原;王憶;韓振海;張新忠
• 申請（專利權）人: 中國農業大學
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895;C12Q1/6858;C12N15/11
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 張立娜

本發明公開了MdLOG基因啟動子缺失片段及其在檢測蘋果屬植物耐鹽性中的應用。本發明提供了MdLOG基因啟動子缺失片段作為分子標記在如下任一中的應用：檢測蘋果屬植物的砧木耐鹽性高低，檢測蘋果屬植物鹽害指數高低，檢測蘋果屬植物是否為耐鹽植物，檢測蘋果屬植物能否用作耐鹽砧木，所述MdLOG基因啟動子缺失片段為SEQ ID No.3所示DNA片段。MdLOG基因啟動子片段缺失現象與耐鹽性正相關，利用該片段的缺失和存在可快速篩選后代中的耐鹽性植株，在植物的耐鹽性領域中具有重要意義。

技術領域

本發明涉及生物技術領域，具體涉及MdLOG基因啟動子缺失片段及其在檢測蘋果屬植物耐鹽性中的應用。

背景技術

砧木可以影響果樹樹體發育，果實產量和品質，抵御環境脅迫。選育耐鹽性砧木可以使鹽漬化立地條件下的蘋果生產獲得更優的產量和品質。

細胞分裂素是促進生長的重要激素，在蘋果砧木八棱海棠根系的DNA中克隆得到細胞分裂素激活酶MdLOG基因，該基因的mRNA全長為1963bp，包含7個外顯子和6個內含子。該基因編碼一個230個氨基酸的多肽，含有一個功能上高度保守的基序PGGXGTXXE。LOG將不活躍的細胞分裂素核苷酸轉化為具有生物活性的游離堿基形式，可催化多種嘧啶和嘌呤核苷酸5'-單磷酸的N-糖苷鍵水解，形成核糖5-磷酸和相應的游離堿。

發明內容

本發明的目的是提供MdLOG基因啟動子缺失片段及其在檢測蘋果屬植物耐鹽性中的應用。

第一方面，本發明要求保護MdLOG基因啟動子缺失片段作為分子標記在如下任一中的應用：

(A1)檢測或輔助檢測蘋果屬植物的砧木耐鹽性高低，或制備用于檢測或輔助檢測蘋果屬植物的砧木耐鹽性高低的產品；

(A2)檢測或輔助檢測蘋果屬植物鹽害指數高低，或制備用于檢測或輔助檢測蘋果屬植物鹽害指數高低的產品；

(A3)檢測或輔助檢測待測蘋果屬植物是否為耐鹽植物，或制備用于檢測或輔助檢測待測蘋果屬植物是否為耐鹽植物的產品；

(A4)檢測或輔助檢測待測蘋果屬植物能否用作耐鹽砧木，或制備用于檢測或輔助檢測待測蘋果屬植物能否用作耐鹽砧木的產品；

所述MdLOG基因啟動子缺失片段為SEQ ID No.3所示DNA片段。所述MdLOG基因啟動子缺失片段為蘋果屬植物基因組MdLOG基因起始密碼子ATG中的A的上游方向第-1305位至第-1278位；以MdLOG基因起始密碼子ATG中的A記作第+1位。

其中，所述砧木耐鹽性指相同的果樹接穗嫁接于不同的砧木上，在200mM濃度的氯化鈉溶液處理30天后，接穗葉片所表現出的性狀，用鹽害指數進行表示。將鹽害指數分為0-4共五個等級：葉片無癥狀為0級；1/3及以下葉片頂端或邊緣焦黃為1級；1/3至2/3(不含端點)葉片頂端或邊緣呈褐色為2級；2/3及以上葉片頂端或邊緣呈褐色或死亡(尚未整株死亡或枯萎)為3級；整株死亡或枯萎為4級。0-1級定義為耐鹽，2-4級定義為不耐鹽。下同。

所述耐鹽指在200mM濃度的氯化鈉溶液處理30天后，植物葉片所表現出的性狀，用鹽害指數進行表示。將鹽害指數分為0-4共五個等級：葉片無癥狀為0級；1/3及以下葉片頂端或邊緣焦黃為1級；1/3至2/3(不含端點)葉片頂端或邊緣呈褐色為2級；2/3及以上葉片頂端或邊緣呈褐色或死亡(尚未整株死亡或枯萎)為3級；整株死亡或枯萎為4級。0-1級定義為耐鹽，2-4級定義為不耐鹽。下同。

第二方面，本發明要求保護用于檢測MdLOG基因啟動子缺失片段的物質在如下任一中的應用：

(A1)檢測或輔助檢測蘋果屬植物的砧木耐鹽性高低，或制備用于檢測或輔助檢測蘋果屬植物的砧木耐鹽性高低的產品；

(A2)檢測或輔助檢測蘋果屬植物鹽害指數高低，或制備用于檢測或輔助檢測蘋果屬植物鹽害指數高低的產品；