[發(fā)明專(zhuān)利]紅細(xì)胞模擬物、其制備方法及質(zhì)控物或校準(zhǔn)物

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202210495652.1
• 申請(qǐng)日: 2022-05-09
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN114591906B
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-09-16
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳偉平;袁治豪;鄭劍通
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 深圳市帝邁生物技術(shù)有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): C12N5/078
• 分類(lèi)號(hào): C12N5/078;A01N1/02;G01N33/50
• 代理公司: 深圳市沈合專(zhuān)利代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 44373
• 代理人: 吳京隆

1.一種紅細(xì)胞模擬物的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）取哺乳動(dòng)物血液，去除血液樣本中的白細(xì)胞及血小板，得到純化的動(dòng)物紅細(xì)胞懸浮液，使用洗滌液將所述純化的動(dòng)物紅細(xì)胞懸浮液調(diào)整至第一預(yù)設(shè)濃度；

（2）使用強(qiáng)化劑與步驟（1）處理后的紅細(xì)胞懸浮液按1：1進(jìn)行混合，對(duì)混合后的混合液進(jìn)行水浴、離心、超聲處理，使用洗滌液將處理后的紅細(xì)胞懸浮液調(diào)整至第二預(yù)設(shè)濃度，所述水浴溫度為30℃；

（3）使用膨脹劑與步驟（2）處理后的紅細(xì)胞懸浮液按4：1或2：1進(jìn)行混合，經(jīng)生化培養(yǎng)箱培養(yǎng)處理，使用洗滌液將處理后的紅細(xì)胞懸浮液調(diào)整至第三預(yù)設(shè)濃度；

（4）使用穩(wěn)定劑與步驟（3）處理后的紅細(xì)胞懸浮液按3：2或4：1進(jìn)行混合，經(jīng)生化培養(yǎng)箱培養(yǎng)處理，使用洗滌液洗滌后用保存液進(jìn)行保存，得到紅細(xì)胞模擬物；

其中，所述強(qiáng)化劑包含：多聚甲醛0.01g~10g，氯化鈉0.1g~50g，苯甲醇0.1g~100g及純化水定容至1L；所述洗滌液包含：氯化鈉9g及純化水定容至1L；所述膨脹劑包含：氯化鈉0.1g~50g，磷酸二氫鉀0.1g~10g，十二水合磷酸氫二鈉0.1g~10g，氯化鉀0.1g~10g及純化水定容至1L；所述穩(wěn)定劑包含：戊二醛0.01g~10g，醋酸鉛0.1g~10g，馬齒莧生物堿0.1g~10g，氯化鈉0.1g~50g，PC150 0.1g~10g及純化水定容至1L；所述哺乳動(dòng)物為牛、豬、馬、狗、兔、豚鼠或大鼠。

2.如權(quán)利要求1所述的紅細(xì)胞模擬物的制備方法，其特征在于，所述步驟（3）中，所述生化培養(yǎng)箱的培養(yǎng)參數(shù)設(shè)置為溫度20℃~25℃，時(shí)間24h~48h。

3.如權(quán)利要求1所述的紅細(xì)胞模擬物的制備方法，其特征在于，所述步驟（4）中，所述生化培養(yǎng)箱的培養(yǎng)參數(shù)設(shè)置為溫度37℃，時(shí)間60min~120min。

4.一種紅細(xì)胞模擬物的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）取哺乳動(dòng)物血液，去除血液樣本中的白細(xì)胞及血小板，得到純化的動(dòng)物紅細(xì)胞懸浮液，使用洗滌液將所述純化的動(dòng)物紅細(xì)胞懸浮液調(diào)整至第一預(yù)設(shè)濃度；

（2）使用強(qiáng)化劑與步驟（1）處理后的紅細(xì)胞懸浮液按1：1進(jìn)行混合，對(duì)混合后的混合液進(jìn)行水浴、離心、超聲處理，使用洗滌液將處理后的紅細(xì)胞懸浮液調(diào)整至第二預(yù)設(shè)濃度，所述水浴溫度為30℃；

（3）使用膨脹劑與步驟（2）處理后的紅細(xì)胞懸浮液按4：1或2：1進(jìn)行混合，經(jīng)生化培養(yǎng)箱培養(yǎng)處理，使用洗滌液將處理后的紅細(xì)胞懸浮液調(diào)整至第三預(yù)設(shè)濃度；

（4）使用穩(wěn)定劑與步驟（3）處理后的紅細(xì)胞懸浮液按3：2或4：1進(jìn)行混合，經(jīng)生化培養(yǎng)箱培養(yǎng)處理，使用洗滌液洗滌后用保存液進(jìn)行保存，得到紅細(xì)胞模擬物；

其中，所述強(qiáng)化劑包含：戊二醛0.01g~10g，氯化鈉0.1g~50g，PC300 0.1g~10g及純化水定容至1L；所述洗滌液包含：氯化鈉9g及純化水定容至1L；所述膨脹劑包含：氟化鈉0.1g~50g，磷酸二氫鉀0.1g~10g，十二水合磷酸氫二鈉0.1g~10g，氯化鉀0.1g~10g及純化水定容至1L；所述穩(wěn)定劑包含：甲醛0.01g~10g，硫酸銅0.1g~10g，蓮心堿0.1g~10g，氯化鈉0.1g~50g，PC300 0.1g~10g及純化水定容至1L；所述哺乳動(dòng)物為牛、豬、馬、狗、兔、豚鼠或大鼠。

5.如權(quán)利要求4所述的紅細(xì)胞模擬物的制備方法，其特征在于，所述步驟（3）中，所述生化培養(yǎng)箱的培養(yǎng)參數(shù)設(shè)置為溫度20℃~25℃，時(shí)間24h~48h。

6.如權(quán)利要求4所述的紅細(xì)胞模擬物的制備方法，其特征在于，所述步驟（4）中，所述生化培養(yǎng)箱的培養(yǎng)參數(shù)設(shè)置為溫度37℃，時(shí)間60min~120min。