[發(fā)明專利]一種嵌合加帽酶及其制備方法與應(yīng)用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 202210495574.5 | 申請日： | 2022-05-09 |
| 公開（公告）號： | CN114574466B | 公開（公告）日： | 2022-08-02 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 滕以剛;袁燦燦;王雪琪;郭帥;王小敏;吳浩東;柴常生;惠豐 | 申請（專利權(quán)）人： | 翌圣生物科技（上海）股份有限公司 |
| 主分類號： | C12N9/16 | 分類號： | C12N9/16;C12N9/10;C12N9/12;C12N15/70;C12P19/34 |
| 代理公司： | 上海雙誠知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 31423 | 代理人： | 高利丹 |
| 地址： | 201318 上海市浦*** | 國省代碼： | 上海;31 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 嵌合 加帽酶 及其 制備 方法 應(yīng)用 | ||
1.一種嵌合加帽酶，其特征在于：其蛋白質(zhì)序列如SEQ ID NO.1所示。
2.一種嵌合加帽酶，其特征在于：其蛋白質(zhì)序列如SEQ ID NO.2所示。
3.含有權(quán)利要求1或2所述嵌合加帽酶的重組表達載體或重組細(xì)胞株。
4.權(quán)利要求1或2所述嵌合加帽酶的制備方法，其特征在于：包括如下步驟：
（1）制備所述嵌合加帽酶的重組表達載體，接種于2YT培養(yǎng)基中，培養(yǎng)，得到種子液；
（2）取所得種子液接種于2YT培養(yǎng)基中，培養(yǎng)，得到菌液；
（3）向所得菌液中加入IPTG至終濃度為0.1～0.5mM，誘導(dǎo)細(xì)胞表達蛋白，離心收集菌體沉淀；
（4）向所得菌體沉淀中加入裂解緩沖液重懸菌體，超聲破碎菌體，離心取上清液；
（5）進行鎳離子親和層析，蛋白變性電泳檢測各個洗脫峰，收集含有目的蛋白的樣品，即獲得所述的嵌合體。
5.權(quán)利要求1或2所述嵌合加帽酶在mRNA加帽中的應(yīng)用。
6.利用權(quán)利要求1或2所述嵌合加帽酶制備的試劑、試紙或試劑盒。
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