[發明專利]一種環糊精葡萄糖基轉移酶突變體及應用

有效

• 申請號: 202210494671.2
• 申請日: 2022-05-07
• 公開（公告）號: CN114836397B
• 公開（公告）日: 2023-05-05
• 發明（設計）人: 王騰飛;劉學軍;蔣藝;劉洪玲;袁海波;黃迪
• 申請（專利權）人: 齊魯工業大學
• 主分類號: C12N9/10
• 分類號: C12N9/10;C12N15/54;C12N15/70;C12N1/21;C12P19/18;C12P19/12;C12P19/00;C12P19/04;C12P19/02;C12R1/19
• 代理公司: 濟南竹森知識產權代理事務所(普通合伙) 37270
• 代理人: 朱洪菊

1.?一種環糊精葡萄糖基轉移酶的突變體，其特征在于，所述突變體為環糊精葡萄糖基轉移酶氨基酸序列SEQ?ID?NO.2的第33位的天冬酰胺（N）突變為賴氨酸（K）或精氨酸（R），分別命名為N33K、N33R；

所述突變體為環糊精葡萄糖基轉移酶氨基酸序列SEQ?ID?NO.2的第119位的酪氨酸（Y）突變為精氨酸（R），命名為Y119R；

所述突變體為環糊精葡萄糖基轉移酶氨基酸序列SEQ?ID?NO.2的第122位的酪氨酸（Y）突變為谷氨酸（E），命名為Y122E；

所述突變體為環糊精葡萄糖基轉移酶氨基酸序列SEQ?ID?NO.2的第216位的亮氨酸（L）突變為谷氨酰胺（Q），命名為L216Q；

所述突變體為環糊精葡萄糖基轉移酶氨基酸序列SEQ?ID?NO.2的第255位的組氨酸（H）突變為酪氨酸（Y），命名為H255Y；

所述突變體為環糊精葡萄糖基轉移酶氨基酸序列SEQ?ID?NO.2的第258位的谷氨酸（E）突變為酪氨酸（Y）或谷氨酰胺（Q），分別命名為E258Y或E258Q；

所述突變體為環糊精葡萄糖基轉移酶氨基酸序列SEQ?ID?NO.2的第394位的脯氨酸（P）突變為精氨酸（R）或谷氨酰胺（Q），分別命名為P394R或P394Q；

或第566位的谷氨酸（E）突變為組氨酸（H），命名為E566H。

2.?一種環糊精葡萄糖基轉移酶的突變體，其特征在于，所述突變體為環糊精葡萄糖基轉移酶氨基酸序列SEQ?ID?NO.2的第33位的天冬酰胺（N）突變為賴氨酸（K）、第122位的酪氨酸（Y）突變為谷氨酸（E）、第258位的谷氨酸（E）突變為酪氨酸（Y）和第394位的脯氨酸（P）突變為精氨酸（R），命名為N33K/Y122E/E258Y/P394R。

3.?權利要求1或權利要求2所述突變體的編碼基因，其特征在于，根據氨基酸突變位點，在環糊精葡萄糖基轉移酶的編碼核苷酸序列SEQ?ID?NO.1上進行定點突變獲得。

4.一種重組表達載體，其特征在于，包含權利要求3所述突變體的編碼基因。

5.一種重組菌株，其特征在于，包含權利要求3所述突變體的編碼基因。

6.權利要求3所述編碼基因、權利要求4所述重組表達載體或權利要求5所述重組菌株在制備環糊精葡萄糖基轉移酶中的應用。

7.權利要求1或權利要求2所述突變體在制備偶合糖中的應用。

8.權利要求1或權利要求2所述突變體在制備海藻糖中的應用。