[發明專利]檢測樣本中HTR6的試劑在制備低級別膠質瘤的預后產品中的應用

在審

• 申請號: 202210493360.4
• 申請日: 2022-05-07
• 公開（公告）號: CN114807371A
• 公開（公告）日: 2022-07-29
• 發明（設計）人: 戴勇;張巍;湯冬娥;徐勇;陳玉梅
• 申請（專利權）人: 深圳市人民醫院
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;G01N33/574
• 代理公司: 廣州嘉權專利商標事務所有限公司 44205
• 代理人: 劉燚

本發明公開了檢測樣本中HTR6的試劑在制備低級別膠質瘤的預后產品中的應用。本發明的第一方面，提供檢測樣本中生物標志物的試劑在制備低級別膠質瘤的預后產品中的應用，生物標志物包括HTR6。根據本申請實施例的應用，至少具有如下有益效果：本發明通過一系列生物信息學分析方法來篩選低級別膠質瘤與正常組織中差異表達的基因或其蛋白質，首次提出HTR6基因或者HTR6蛋白作為低級別膠質瘤預后進行判斷的生物標志物，彌補了現有低級別膠質瘤預后指標的不足，具有良好的臨床價值。

技術領域

本申請涉及膠質瘤診斷技術領域，尤其是涉及檢測樣本中HTR6的試劑在制備低級別膠質瘤的預后產品中的應用。

背景技術

膠質瘤是目前最常見的原發性中樞神經系統惡性腫瘤之一，約占所有中樞神經系統惡性腫瘤的80％。根據WHO描述的相關標準，膠質瘤可以分為I～IV級，其中，I、Ⅱ級為低級別，Ⅲ、IV級為高級別。I級膠質瘤為良性腫瘤，多發于兒童，治療方法以手為主；III～IV級膠質瘤為惡性腫瘤，多發于中老年，治療時需要結合手術、放療及化療等多種手段；相比之下，II級膠質瘤為低級別膠質瘤(low grade glioma，LGG)，其介于良性與惡性之間，多發于中青年。低級別膠質瘤有去分化和轉化為高級別膠質瘤的傾向，術后容易復發且升高級別，臨床上存在較高的致殘率和病死率。因此，有必要提供一種能夠對低級別膠質瘤進行有效預后評估的產品。

發明內容

本申請旨在至少解決現有技術中存在的技術問題之一。為此，本申請提出一種具有良好的預后價值的低級別膠質瘤標志物。

本申請的第一方面，提供檢測樣本中生物標志物的試劑在制備低級別膠質瘤的預后產品中的應用，生物標志物包括HTR6。

根據本申請實施例的應用，至少具有如下有益效果：

本申請通過一系列生物信息學分析方法來篩選低級別膠質瘤與癌旁組織和正常組織中差異表達的基因或其蛋白質，首次提出HTR6基因或者HTR6蛋白作為低級別膠質瘤預后判斷的生物標志物，彌補了現有低級別膠質瘤相關指標的不足，具有良好的臨床價值。

其中，HTR6(5-Hydroxytryptamine Receptor 6)是5-羥色胺受體6，HTR6基因編碼一種屬于七重跨膜G蛋白偶聯受體蛋白質家族的蛋白質。編碼蛋白與Gsα亞單位偶聯，刺激腺苷酸環化酶激活環腺苷酸依賴性信號通路，參與調節大腦中膽堿能神經元的傳遞。

在本申請的一些實施方式中，試劑采用測序技術、核酸雜交技術、核酸擴增技術、蛋白免疫技術中的至少一種檢測生物標志物，具體包括但不限于聚合酶鏈反應(PCR)、等溫擴增反應(如環介導等溫擴增LAMP、重組酶聚合酶擴增RPA等)、探針雜交技術、RNA印跡等方法。在蛋白水平上定量檢測HTR6蛋白的試劑通過以下方法進行，包括但不限于酶聯免疫反應(ELISA)、放射免疫反應(IRA)、免疫組化染色、蛋白質印跡、電泳、液相色譜-質譜/質譜(LC-MS/MS)等。

在本申請的一些實施方式中，試劑為特異性識別生物標志物的探針、特異性擴增生物標志物的引物、特異性結合生物標志物的抗體中的至少一種。

其中，在基因水平上定量檢測HTR6的試劑包括但不限于引物、探針和基因芯片。其中，引物是指能夠特異性擴增HTR6基因的引物，例如一定長度的多核苷酸，如約35個核苷酸或者更長的引物，其能夠與模板序列的至少部分進行雜交并用作合成引物延伸產品的起始位點。探針是指能夠特異性識別HTR6基因或者該基因轉錄本的探針，其是一種能夠結合另一個分子的特定序列或子序列或其他部分的分子，通常是指通過互補堿基配對結合另一個核酸(即作為靶核苷酸的HTR6的特異性序列)的核酸探針。而基因芯片是指在基底材料(具體包括但不限于聚合物如尼龍膜、硝酸纖維素膜以及玻璃等)上固定有前述的探針的陣列所形成的復合結構。