[發明專利]一種用硅藻土固定芽孢桿菌生產的生物制劑

有效

• 申請號: 202210486795.6
• 申請日: 2022-05-06
• 公開（公告）號: CN114717156B
• 公開（公告）日: 2023-08-01
• 發明（設計）人: 陸穎健;孫靜;張進
• 申請（專利權）人: 南京財經大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N11/14;A01G13/00;A23B7/155;A23B9/28;A23K10/18;A23K20/28;A23K50/30;C12R1/125
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 唐蕙芬

本發明公開了一種用硅藻土固定芽孢桿菌生產的生物制劑，屬于微生物制劑領域。采用硅藻土吸附培養液中的枯草芽孢桿菌(Bacillus?subtilis)fmbJ(CGMCC?No.0943)，能夠短時間內獲得大量活性細胞，過濾干燥后得到生物制劑，獲得生物制劑的制備方法簡便，不易變質，干燥且芽孢處于休眠狀態，生物量巨大對比其余生物制劑，生物量達到5.09×10supgt;10/supgt;CFU/g，貯藏性能穩定。

一、技術領域

本發明涉及微生物制劑領域，具體涉及一種用硅藻土固定芽孢桿菌生產的生物制劑。

二、背景技術

目前關于糧食貯藏、果蔬保鮮方面主要還是采用化學抑菌劑，化學抑菌劑的大量使用導致化學殘留問題，危害人體健康，加劇環境污染和大量的資源浪費。現在世界上都在迫切尋求一種新的化學抑菌劑替代品。枯草芽孢桿菌(Bacillus?subtilis)fmbJ屬于革蘭氏陽性菌，芽孢桿菌屬，可以形成保護性的內生孢子，對人畜無害，同時它可以分泌抗菌活性物質而作為生防菌以及用于糧食貯藏、果蔬保鮮等(Growth?inhibition?of?Fusariumgraminearum?and?reduction?of?deoxynivalenol?production?in?wheat?grain?bybacillomycin?D.Journal?of?Stored?Products?Research,2018,75,21-28；Effect?ofcombined?Bacillomycin?D?and?chitosan?on?growth?of?Rhizopus?stolonifer?andBotrytis?cinerea?and?cherry?tomato?preservation,Journal?of?the?Science?ofFood?and?Agriculture,101,229-239)。將其作為生物制劑面臨的問題是芽孢穩定性差，制備時間長，步驟繁瑣、獲取成本高，獲得的芽孢數量少(LB培養基培養36h，獲得芽孢數僅為10⁸CFU/mL)等問題。

采用微生物固定的方法來解決上述出現的問題，首先需解決吸附材料的問題。目前國內外研究成果顯示芽孢桿菌屬的吸附方法主要采用石粉進行吸附，采用冷凍干燥和噴霧干燥的方法干燥分離得到的固形物。但是其工藝涉及多個高耗能單元，能源及設備投入較高，且吸附效果和微生物活性不好。

硅藻土是一種重要的礦產資源，是硅藻生物死亡后遺骸沉淀堆積形成的生物沉積巖，也被廣泛稱為無定形硅石。硅藻土表面少量的微孔、介孔與大量的大孔組成其獨特的多級孔道結構。它的儲存量巨大，世界上已探明的儲量為18-20億噸，并廣泛分布于全球。硅藻土擁有千差萬別的形態，大多呈現為圓盤狀、棒狀、帶狀。其中圓盤狀硅藻土由上下兩個半殼套合在一起構成，其結構骨架呈現為蜂窩狀，具有孔隙率高、體積密度低、比表面積大、吸附能力強、吸附性能好等特點，長度通常為1-100μm。因此，硅藻土可作為助濾、吸附、保溫隔熱和催化載體等材料廣泛應用于石油化工、環境、食品、建筑等各個領域。是作為微生物吸附的優良載體。

三、發明內容

技術問題

本發明的目的是尋找一種綠色、環保、性質穩定、效果優良的微生物源生物制劑。

技術方案

本發明的目的通過以下技術方案得以實現。

一種用硅藻土固定芽孢桿菌生產的生物制劑，其特征在于，是用硅藻土通過水浴振蕩吸附包埋保藏號為CGMCC?No.0943，菌種濃度為(5-6)×10⁸CFU/mL的枯草芽孢桿菌(Bacillus?subtilis)fmbJ培養液后，過濾烘干獲得的生物制劑。將獲得的生物制劑密封貯藏于陰涼干燥處；

所述枯草芽孢桿菌fmbJ培養液是通過以下方式制備獲得的：將枯草芽孢桿菌fmbJ接種于液體LB培養基，37℃、180rpm下培養36h獲得的菌液為枯草芽孢桿菌fmbJ培養液。