[發明專利]一株耐鎘且能吸附鎘的彎孢菌菌株及其應用

在審

• 申請號: 202210471437.8
• 申請日: 2022-04-28
• 公開（公告）號: CN114907987A
• 公開（公告）日: 2022-08-16
• 發明（設計）人: 羅利利;李智;曾小燕;張樂陽;徐鈺青
• 申請（專利權）人: 江西師范大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12N1/02;C02F3/34;C02F101/20;C12R1/645
• 代理公司: 南昌華成聯合知識產權代理事務所(普通合伙) 36126
• 代理人: 張建新

本發明提供了一株耐鎘且能吸附鎘的彎孢菌菌株及其應用。該菌株命名為彎孢菌CLD001（Curvularia CLD001），于2022年4月8日保藏于中國普通微生物菌種保藏管理中心，保藏編號為CGMCC No.40127，保藏地址為北京市朝陽區北辰西路1號院3號中國科學院微生物研究所，保藏地址的郵編為100101。該菌株能夠吸附重金屬鎘。

技術領域

本發明涉及彎孢菌(Curvularia)，具體涉及一株從水稻中分離出的具有高抗鎘和高效吸附鎘的彎孢菌株，其能高效吸附重金屬鎘。

背景技術

鎘是重要的環境污染物，主要來源于礦產冶煉、電鍍和塑料制品生產等。鎘污染很難在環境中降解，往往通過食物鏈途徑進入生物體內。當生物體內的鎘含量超過一定限量時﹐便會破壞生物體正常的新陳代謝，從而危害生態環境及人畜健康。當前，重金屬污染日益嚴重，污染治理已迫在眉睫，重金屬污染中主要是鎘污染。

傳統的修復污水中重金屬離子方法存在許多無法避免的副作用：如處理效率較低、成本高、一級存在二次污染等問題。近10年來，生物吸附作為一個理想的效率高、成本低的污水處理方法被呼吁，微生物可通過生物轉化和生物吸附改變土壤中重金屬的生物有效性，從而清除或穩定環境中的重金屬，生物法治理重金屬污染已被認可并廣泛應用，因此，尋找到一種具有重金屬鎘吸附功能的微生物去修復污水具有十分重要的意義。

當前，彎孢菌(Curvularia)的研究大多集中在其致病性以及分類鑒定上，對其重金屬抗性特別是鎘耐受性和鎘吸附性的研究報道極少。

發明內容

本發明的目的在于提供一株耐鎘且能吸附鎘的彎孢菌菌株，及其吸附鎘的應用。

本發明所述耐鎘且能吸附鎘的彎孢菌菌株從水稻種子中自然分離獲得，對其進行了形態學、生理生化性質和ITS測序鑒定，將該菌株命名為彎孢菌CLD001(CurvulariaCLD001)，屬半知菌類、叢梗孢目、暗梗孢科、彎孢屬。該菌株已于2022年4月8日保藏于中國普通微生物菌種保藏管理中心，保藏編號為CGMCC No.40127，保藏地址為北京市朝陽區北辰西路1號院3號中國科學院微生物研究所，保藏地址的郵編為100101。

具體地，該菌株的ITS序列如SEQ ID No.3所示。

本發明還提供了所述的彎孢菌CLD001菌株的分離純化、鑒定的方法以及該菌對鎘吸附性的研究，包括如下步驟：菌種分離純化、原種制作、CLD001菌株對鎘吸附性研究。所述原種制作是指將彎孢菌CLD001母種接種到液體培養基或固體培養基中得到液體菌種或固體菌種。

具體地，菌種分離純化的操作如下：

(1)耐鎘菌株的初篩：從水稻種子中分離出耐鎘的菌株，將菌株接種到氯化鎘濃度為25mmol/L(5709mg/L)的固體平板培養基上篩選培養，每個濃度設置3個重復；28℃恒溫培養4～8d，觀察記錄單菌落特征；

(2)耐鎘真菌復篩：在無菌條件下，用接種針挑取氯化鎘濃度為25mmol/L(5709mg/L)平板固體培養基上各個單菌落分別劃線于濃度梯度為25mmol/L(5709mg/L)和50mmol/L(11418mg/L)的PDA氯化鎘固體平板培養基上篩選耐鎘能力強的菌株，得到的菌株在平板上劃線轉接3次以上進行菌株純化，并挑選長勢好、菌落飽滿的單菌接種到馬鈴薯培養基平板，作為彎孢菌CLD001母種。

具體地，得到所述液體菌種的操作如下：彎孢菌CLD001母種轉接到PDA液體培養基中，置于180r/min的搖床上，28℃暗光培養4～8d，得到液體菌種。

進一步地，得到所述固體菌種的操作如下：彎孢菌CLD001母種接入PDA固體培養基中，28℃培養10～15d，得到固體菌種。