[發明專利]一種高表達病毒的人胚胎腎細胞293及其用途

有效

• 申請號: 202210471163.2
• 申請日: 2022-04-28
• 公開（公告）號: CN114807047B
• 公開（公告）日: 2022-11-15
• 發明（設計）人: 潘洪輝;喻曉瑜;袁軍;胥文彥;謝國豪;吳帆
• 申請（專利權）人: 中山康天晟合生物技術有限公司
• 主分類號: C12N5/10
• 分類號: C12N5/10;C12N5/071;C12N5/073;C12N7/00;C12N15/864
• 代理公司: 廣州科粵專利商標代理有限公司 44001
• 代理人: 劉明星;朱聰聰

本發明公開了一種高表達病毒的人胚胎腎細胞293及其用途。人胚胎腎細胞293(Wayne293cell line)，保藏編號為：CGMCC No.45137。本發明的Wayne 293cell line細胞具有密度高、瞬轉效率高、病毒包裝滴度高，能夠高表達病毒的Wayne 293cell line細胞，最高密度方面可以達到6.7×10⁶Cell/mL,比傳統細胞高3×10⁶CELL/mL；瞬轉效率達到73％，比傳統細胞高21％；病毒包裝滴度達到5×10¹⁴vg/L,比傳統細胞高4×10¹⁴vg/L，市場前景廣闊。

技術領域：

本發明屬于生物技術領域，具體涉及一種高表達病毒的人胚胎腎細胞293及其用途。

背景技術：

動物細胞表達的腺病毒藥物銷售額迅速增長，作為商業化生產腺病毒的核心技術之一的大規模動物細胞懸浮培養成為腺病毒藥物發展的新瓶頸。其中之一主要技術限制就是國內沒有自己的高效能商業化動物懸浮培養基，而SIGMA、Invitrogen、Hyclone和Lonza等國際知名培養基，每升高達上千元，且配方保密，不利于后續的培養工藝優化。故研制出自主品牌且低成本的無血清無動物來源培養基，對工藝優化與反應器放大，以滿足大量表達基因治療性病毒的需求，對于病毒藥物的產業化的意義是非常重大的。

市場病毒藥物70％以上都是由HEK203細胞宿主細胞表達。目前WAYNE293 LVPRO無法高表達病毒，本領域技術人員希望能夠獲得高表達病毒的WAYNE293 LVPRO細胞。

發明內容：

本發明提供一種Wayne 293cell line細胞，其具有密度高、瞬轉效率高、病毒包裝滴度高，能夠高表達病毒的優點。

本發明的人胚胎腎細胞293(Wayne 293cell line)，其于2022年3月28日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(CGMCC)，地址：北京市朝陽區北辰西路1號院3號，中國科學院微生物研究所，郵編：100101，保藏編號為：CGMCC No.45137。

本發明的第二個目的是提供上述Wayne 293cell line細胞在表達病毒中的應用。

優選，所述的病毒是腺病毒。

本發明的第三個目的是提供一種利用Wayne 293cell line細胞表達病毒的方法，其是將病毒轉染進入Wayne 293cell line細胞中，使Wayne 293cell line細胞表達病毒。

優選，所述的病毒是腺病毒。

本發明的Wayne 293cell line細胞具有密度高、瞬轉效率高、病毒包裝滴度高，能夠高表達病毒的Wayne 293cell line細胞，最高密度方面可以達到6.7×10⁶Cell/mL,比傳統細胞高3×10⁶CELL/mL；瞬轉效率達到73％，比傳統細胞高21％；病毒包裝滴度達到5×10¹⁴vg/L,比傳統細胞高4×10¹⁴vg/L，市場前景廣闊。

人胚胎腎細胞293(Wayne 293cell line)，其于2022年3月28日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(CGMCC)，地址：北京市朝陽區北辰西路1號院3號，中國科學院微生物研究所，郵編：100101，保藏編號為：CGMCC No.45137

具體實施方式：

以下實施例是對本發明的進一步說明，而不是對本發明的限制。

實施例1：

1、篩選方法：