[發明專利]羥甲基香豆素在制備抗沙門氏菌毒力抑制劑中的應用

在審

• 申請號: 202210463785.0
• 申請日: 2022-04-14
• 公開（公告）號: CN114681441A
• 公開（公告）日: 2022-07-01
• 發明（設計）人: 邱家章;劉洪濤;舒婧妍;鄧旭明;王建鋒;馮海華
• 申請（專利權）人: 吉林大學
• 主分類號: A61K31/37
• 分類號: A61K31/37;A61P31/04
• 代理公司: 深圳眾邦專利代理有限公司 44545
• 代理人: 李茂松

本發明涉及羥甲基香豆素在制備沙門氏菌Ⅲ型分泌系統(T3SS)抑制劑及抗沙門氏菌感染藥物中的應用。通過體外細胞(人宮頸癌細胞系，HeLa)感染保護實驗及鼠傷寒沙門氏菌感染小鼠的治療試驗證實羥甲基香豆素通過抑制T3SS的功能來發揮沙門氏菌感染。與傳統抗生素相比，羥甲基香豆素可通過抑制T3SS的功能來發揮抗感染的作用，故不易誘導細菌耐藥性的產生。

技術領域

本發明涉及羥甲基香豆素抑制沙門氏菌Ⅲ型分泌系統(T3SS)及在制備治療沙門氏菌感染藥物中的應用，屬于醫學制藥技術領域。

背景技術

7-羥基-4-甲基香豆素，又稱羥甲基香豆素，英文名稱4-Methylumbelliferone，屬香豆素衍生物。常溫下為白色或類白色結晶性粉末，無臭，無味。不溶于水，略溶于甲醇、乙醇，易溶于氫氧化鈉溶液。羥甲基香豆素是一種利膽藥，也是抗過敏藥色甘酸鈉的中間體。對膽道口括約肌有舒張作用，具有較強的解痙、鎮痛作用，同時也能溫和、持續地促進膽汁分泌，加強膽囊收縮和抑菌作用，具有明顯的利膽作用，有利于結石排出，對膽總管結石有一定排石效果。

鼠傷寒沙門氏菌是一種人畜共患食源性細菌病原體，可導致全球人類和動物食物中毒，并對公眾健康和食品安全構成嚴重威脅。目前，抗生素被廣泛用于治療鼠傷寒沙門氏菌感染，但長期使用抗生素不可避免地導致細菌耐藥性的產生。隨著抗生素耐藥性的增加，細菌感染的治療幾乎變得無效，迫切需要一種新的治療策略來對抗感染。

抗毒力策略是非常有前景的解決抗生素耐藥問題的手段之一。沙門氏菌T3SS是一種類似注射器的精密分子機器，可促使細菌在宿主細胞中入侵和復制，也是篩選抗毒力抑制劑的重要靶標。沙門氏菌入侵宿主細胞需要SipA、SipB、SipC等T3SS效應蛋白進入宿主細胞，通過誘導宿主細胞骨架重構促進沙門氏菌入侵細胞。其中SipA是細菌入侵宿主細胞的關鍵蛋白，SipB則與SipC形成蛋白質復合物來促進鼠傷寒沙門氏菌宿主細胞的侵襲。因此，沙門氏菌T3SS毒力系統是抗毒力抑制劑研發的理想靶標。

發明內容

本發明所述羥甲基香豆素CAS登錄號為90-33-5，分子式為C₁₀H₈O₃，分子量為176.17。

羥甲基香豆素的化學結構式如下：

本研究以沙門氏菌T3SS效應蛋白為藥物靶標篩選得到的天然化合物羥甲基香豆素在較低濃度下通過阻斷T3SS關鍵效應蛋白SipA的轉運而抑制沙門氏菌T3SS的功能，顯著降低效應蛋白SipB的表達水平且不影響細菌生長。體外試驗表明，經羥甲基香豆素預處理沙門氏菌后，沙門氏菌侵入HeLa細胞的能力顯著降低。體內試驗中，經羥甲基香豆素治療后沙門氏菌感染小鼠存活率達30％，靶器官(肝臟、脾臟)菌落定殖數顯著降低。

附圖說明

圖1：流式細胞術檢測羥甲基香豆素抑制沙門氏菌Ⅲ型分泌系統的能力(橫坐標代表藍色熒光強度，藍色熒光表明T3SS分泌功能正常，即表示效應蛋白SipA能夠正常轉運；縱坐標表示細胞數量)

圖2：羥甲基香豆素治療顯著提高沙門氏菌感染小鼠保護率(橫軸表示時間，縱軸表示存活率)

圖3：羥甲基香豆素降低感染小鼠靶器官菌落定殖數(橫軸表示不同處理組肝臟、脾臟，縱軸為菌落定殖數)

具體實施方式

通過以下實施進一步舉例描述本發明，并不以任何方式限制本發明，在不背離本發明的技術解決方案的前提下，對本發明所作的本領域普通技術人員容易實現的任何改動或改變都將落入本發明的權利要求范圍之內。

實施例1

羥甲基香豆素作為沙門氏菌T3SS抑制劑及在制備治療沙門氏菌感染藥物中的作用，用于藥學上可接受的任何載體。

實施例2