[發明專利]一種檢測即食果蔬中致病微生物的引物探針及其制備方法

在審

• 申請號: 202210462580.0
• 申請日: 2022-04-28
• 公開（公告）號: CN114774587A
• 公開（公告）日: 2022-07-22
• 發明（設計）人: 楊丹妮;賈衛昌;耿成鋼;高蕙文;袁荷芳;張曉金;鄒雨虹;蔣靜嫻;李文靜;周航
• 申請（專利權）人: 常州市食品藥品纖維質量監督檢驗中心;四川華漢三創生物科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/689;C12Q1/686;C12Q1/6816;C12Q1/14;C12Q1/10;C12Q1/04;C12N15/11
• 代理公司: 廣州三環專利商標代理有限公司 44202
• 代理人: 王志

本申請公開了一種檢測即食果蔬中致病微生物的引物探針及其制備方法，所述引物探針為由以下引物探針組組合獲得的多重引物探針組：用于檢測細菌內參的引物探針組A，用于檢測沙門氏菌的引物探針組B，用于檢測大腸O157的引物探針組C，用于檢測金黃色葡萄球菌的引物探針組D，用于檢測單增李斯特菌的引物探針組E，用于檢測輪狀病毒的引物探針組F，用于檢測諾如病毒GI型的引物探針組G，用于檢測諾如病毒GII型的引物探針組H，用于檢測病毒外參的引物探針組I。旨在解決現有技術對即食果蔬中的致病微生物篩檢效率低的問題。

技術領域

本申請涉及生物檢測技術領域，尤其涉及一種檢測即食果蔬中致病微生物的引物探針及其制備方法。

背景技術

即食生鮮果蔬食品因為食用方便、口味清新和味道鮮美，更是人們日常生活中和餐桌上常見的食物，但是，生鮮果蔬食品在果蔬的采摘、運輸、清洗、加工和消費過程中，致病菌也易因運輸車輛、加工和儲存器具，以及清洗水源的不潔凈或人工操作的不規范而交叉污染。僅經簡單清洗，未經高溫殺菌處理，其表面和內部附著的微生物，尤其是金黃色葡萄球菌、沙門氏菌、單核細胞增生李斯特氏菌、大腸埃希氏菌及部分病毒(諾如病毒、輪狀病毒)等水果蔬菜中常見的致病微生物因而可能部分殘留，給生鮮果蔬食品的食用安全性造成了極大的隱患，而就目前而言，現有的檢測技術對即食生鮮果蔬食品中致病微生物的篩檢效率低。

發明內容

本申請的主要目的是提供一種檢測即食果蔬中致病微生物的引物探針及其制備方法，旨在解決現有的檢測技術對即食生鮮果蔬食品中致病微生物的篩檢效率低的問題。

為解決上述技術問題，本申請提出了：一種檢測即食果蔬中致病微生物的引物探針，為由以下引物探針組組合獲得的多重引物探針組：

用于檢測細菌內參的引物探針組A，所述引物探針組A包括引物A1、引物A2和探針A；其中，引物A1的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，引物A2的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，探針A的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；

用于檢測沙門氏菌的引物探針組B，所述引物探針組B包括引物B1、引物B2和探針B；其中，引物B1的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示，引物B2的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示，探針B的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示；

用于檢測大腸O157的引物探針組C，所述引物探針組C包括引物C1、引物C2和探針C；其中，引物C1的核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示，引物C2的核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示，探針C的核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示；

用于檢測金黃色葡萄球菌的引物探針組D，所述引物探針組D包括引物D1、引物D2和探針D；其中，引物D1的核苷酸序列如SEQ ID NO.10所示，引物D2的核苷酸序列如SEQ IDNO.11所示，探針D的核苷酸序列如SEQ ID NO.12所示；

用于檢測單增李斯特菌的引物探針組E，所述引物探針組E包括引物E1、引物E2和探針E；其中，引物E1的核苷酸序列如SEQ ID NO.13所示，引物E2的核苷酸序列如SEQ IDNO.14所示，探針E的核苷酸序列如SEQ ID NO.15所示；

用于檢測輪狀病毒的引物探針組F，所述引物探針組F包括引物F1、引物F2和探針F；其中，引物F1的核苷酸序列如SEQ ID NO.16所示，引物F2的核苷酸序列如SEQ ID NO.17所示，探針F的核苷酸序列如SEQ ID NO.18所示；

用于檢測諾如病毒GI型的引物探針組G，所述引物探針組G包括引物G1、引物G2和探針G；其中，引物G1的核苷酸序列如SEQ ID NO.19所示，引物G2的核苷酸序列如SEQ IDNO.20所示，探針G的核苷酸序列如SEQ ID NO.21所示；