[發明專利]基于桃蚜效應因子MpC002基因的dsRNA及其在防治桃蚜中的應用

在審

• 申請號: 202210443113.3
• 申請日: 2022-04-25
• 公開（公告）號: CN114921467A
• 公開（公告）日: 2022-08-19
• 發明（設計）人: 陳青;梁曉;伍春玲;劉迎;劉小強
• 申請（專利權）人: 中國熱帶農業科學院三亞研究院
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;C12N15/29;C12N15/82;A01H5/00;A01H6/82;A01G7/06;A01G13/00
• 代理公司: 深圳市創富知識產權代理有限公司 44367
• 代理人: 高冰

本發明屬于生物技術領域，涉及桃蚜防控技術領域，具體涉及基于桃蚜效應因子MpC002基因的dsRNA及其在防治桃蚜中的應用。本發明公開了一種基于桃蚜效應因子MpC002基因的dsRNA，通過RNA干擾技術可顯著降低桃蚜MpC002基因的表達量，顯著提高桃蚜的死亡率，顯著降低桃蚜的繁殖力，在影響桃蚜與寄主的親和性，特別是在取食后的定殖存活和繁殖方面具有重要作用。同時，將應用桃蚜效應因子MpC002基因片段合成的dsRNA用于防治蚜蟲具有物種特異性、安全性和高效性等優勢，在蚜蟲綠色防控中具有良好的市場應用前景和潛在的經濟、生態效益，可為蚜蟲綠色防控提供一項新的防治途徑。

技術領域

本發明屬于生物技術領域，涉及桃蚜防控技術領域，具體涉及基于桃蚜效應因子MpC002基因的dsRNA及其在防治桃蚜中的應用。

背景技術

桃蚜【Myzus persicae(Sulzer)】屬半翅目(Hemiptera)、蚜科(Aphididae)，是一種廣食性世界危險性害蟲，寄主植物近300種，不僅能直接刺吸梨、桃、李、梅、櫻桃等薔薇科果樹和辣椒、白菜、甘藍、蘿卜等多種蔬菜，還是黃瓜花葉病毒(CMV)、馬鈴薯Y病毒(PVY)和煙草蝕紋病毒(TEV)等116種世界危險性病毒的傳播媒介，傳毒危害損失更為嚴重。由于桃蚜生活周期短、繁殖量大、成災頻繁，因此防治難度大。目前，果蔬生產中主要依賴藥劑防治桃蚜的發生危害，但大量高頻率不合理用藥所帶來的農產品安全、害蟲抗藥性、產地生態環境安全等問題非常突出，嚴重制約了果蔬產業的健康持續發展。因此，尋求綠色高效的桃蚜防控途徑已成為果蔬產業發展中亟需解決的重大難題。

植物介導的RNAi技術(RNAinterference，RNAi)已成為農作物抗蟲基因工程的熱點之一。RNAi技術是將與目的基因同源的dsRNA(double-strand RNA)導入活體生物體內引起基因沉默的現象。相比于其他基因工程研究方法，具有特異性、安全性和高效性等優勢，被廣泛地應用于生物學中特定基因功能的研究。近年來，利用dsRNA體外飼喂或注射來篩選RNA靶標基因，導致靶標基因表達和沉默，已經廣泛應用于昆蟲生長發育關鍵基因的鑒定和功能分析。

效應因子MpC002是桃蚜唾液蛋白中鑒定出的最具特征性的蛋白，是一種能夠幫助其操控寄主細胞并提高自身侵染能力，繼而順利完成定殖的重要因子，在桃蚜和寄主的親和性中發揮著重要作用。而且MpC002基因只有在桃蚜以植物為食時才發揮作用，具有明顯的物種特異性。因此，深度挖掘具有調控桃蚜取食危害的效應因子MpC002的基因功能，可為桃蚜效應因子MpC002基因片段合成的dsRNA在防治蚜蟲中的廣泛應用提供重要的科學依據。然而，目前尚未有有效的RNAi技術體系構建出可有效防治蚜蟲的dsRNA。

發明內容

為了克服上述現有技術的不足，本發明的目的是提供一種基于桃蚜效應因子MpC002基因的dsRNA，通過RNA干擾技術抑制桃蚜效應因子MpC002基因表達，顯著提高桃蚜的死亡率，顯著降低桃蚜的繁殖力及其與寄主的親和性。

為實現上述目的，本發明是通過以下技術方案來實現的：

本發明提供了一種基于桃蚜效應因子MpC002基因的dsRNA，所述dsRNA具有如SEQID NO.5所示的核苷酸序列。

本發明還提供了所述dsRNA的編碼基因。

本發明還提供了含所述dsRNA或其編碼基因的重組表達載體、轉基因細胞系、重組菌、表達盒。

優選地，所述dsRNA的合成引物具有如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示的核苷酸序列。

優選地，所述桃蚜的寄主為辣椒。比如感蚜參照辣椒品種DYJ【大羊角椒(DYJ)(S)】。

本發明還提供了所述的dsRNA或其編碼基因在制備防治桃蚜的產品中的應用。