[發明專利]一種預防和治療帕金森氏病的組合物及其制備方法

有效

• 申請號: 202210439953.2
• 申請日: 2022-04-25
• 公開（公告）號: CN114767728B
• 公開（公告）日: 2023-04-18
• 發明（設計）人: 侯曉麗;程宏;何珺;賀浩珂
• 申請（專利權）人: 揚州市職業大學(揚州開放大學)
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A61K36/45;A61P25/16
• 代理公司: 北京知漢亭知識產權代理事務所(普通合伙) 16011
• 代理人: 胡麗琴

1.一種預防和治療帕金森氏病的藥物的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

S1.藍莓提取物的制備：將藍莓洗凈，干燥至足干后，粉碎，加入水中，微波加熱提取，過濾，濃縮，冷凍干燥，得到藍莓提取物；

S2.培養基的制備：將步驟S1制得的藍莓提取物、碳源、可溶性氮源、維生素、無機鹽用無菌水溶解，用PBS溶液調節培養基pH值，滅菌備用；所述藍莓提取物、碳源、可溶性氮源、維生素、無機鹽和無菌水的質量比為（5-7）：（7-12）：（2-5）：（0.5-1）：（0.1-2）：100；所述pH值調節至6.7-7.2；

S3.菌種種子液的制備：將丁酸梭菌、嗜酸乳桿菌、發酵乳桿菌和乳雙歧桿菌JYBR-190分別接種到高氏培養基中，分別培養成菌種種子液；所述丁酸梭菌、嗜酸乳桿菌、發酵乳桿菌和乳雙歧桿菌JYBR-190的質量比為（3-5）：（1-2）：（2-3）：（2-4）；

S4.發酵組合物的制備：將步驟S3制得的菌種種子液分別接種到步驟S2制得的培養基中進行第一次發酵培養，得到發酵組合物；所述各種菌種種子液的接種量均為3-5%；

S5.中藥酶解組合物的制備：將蟬衣、山茱萸、羚羊角分別洗凈，干燥，打粉后，加入水中，加入復合酶酶解，滅酶，過濾，濾液冷凍干燥，得到中藥酶解組合物；所述蟬衣、山茱萸、羚羊角的質量比為（5-7）：（2-4）：（3-5）；所述復合酶為纖維素酶和蛋白酶的組合物，質量比為（2-5）：7；

S6.第二次發酵：向步驟S4中的發酵組合物中加入步驟S5中制得的中藥酶解組合物，攪拌混合均勻后，進行第二次發酵培養，得到益生菌發酵中藥組合物；所述發酵組合物和中藥酶解組合物的質量比為10：（3-5）；

S7.抗氧化組合物的制備：將姜黃素和維生素C混合后，研細，過篩，得到抗氧化組合物；所述姜黃素和維生素C的質量比為（3-5）：2；

S8.益生元的制備：將阿拉伯糖和菊粉混合后，研細，過篩，得到益生元；所述阿拉伯糖和菊粉的質量比為（5-7）：3；

S9.短鏈脂肪酸的制備：將α-硫辛酸和丁酸鹽混合后，研細，過篩，得到短鏈脂肪酸；所述α-硫辛酸和丁酸鹽的質量比為（1-3）：5；

S10.預防和治療帕金森氏病的組合物的制備：將步驟S6制得的益生菌發酵中藥組合物、步驟S7制得的抗氧化組合物、步驟S8制得的益生元、步驟S9制得的短鏈脂肪酸混合均勻，得到預防和治療帕金森氏病的藥物；所述益生菌發酵中藥組合物、抗氧化組合物、益生元、短鏈脂肪酸的質量比為（10-15）：（2-5）：（1-4）：（2-5）。

2.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟S1中所述微波加熱提取的條件為1000-2000W功率下，加熱至70-90℃，提取2-4h。

3.根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于，所述碳源選自菊粉、糖蜜、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、乳糖、果糖、水溶性淀粉中的至少一種；所述可溶性氮源選自硝酸鹽、銨鹽、尿素、氨基酸中的至少一種；所述氨基酸選自苯丙氨酸、絲氨酸、賴氨酸、蘇氨酸、甘氨酸、纈氨酸、色氨酸、亮氨酸、丙氨酸、半胱氨酸、甲硫氨酸、異亮氨酸中的至少一種；所述硝酸鹽選自硝酸鈉、硝酸鉀、硝酸鈣中的至少一種；所述維生素選自泛酸、葉酸、維生素C、維生素B1、維生素B2、維生素B6、維生素A、維生素K、維生素B12、維生素D、維生素E中的至少一種；所述無機鹽選自氯化鈉、氯化鉀、硫酸鉀、硫酸鈉、氯化鈣、氯化鎂、硫酸鎂、硫酸鐵、氯化鐵、氯化亞鐵、硫酸亞鐵、氯化鋅、硫酸鋅、氯化銅、硫酸銅、氯化錳、硫酸錳中的至少一種。

4.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟S3中所述培養的條件為35-40℃，培養時間為18-24h；所述菌種種子液中含菌量為10⁸-10⁹cfu/mL；步驟S4中所述第一次發酵培養的條件為36-38℃，培養36-60h。

5.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟S5中所述蛋白酶選自木瓜蛋白酶、無花果蛋白酶、菠蘿蛋白酶、胰蛋白酶中的至少一種；步驟S6中所述第二次發酵培養的條件為36-38℃，培養48-72h。