[發明專利]高效捕獲和無損釋放循環腫瘤細胞的納米磁性親和材料

在審

• 申請號: 202210433043.3
• 申請日: 2022-04-24
• 公開（公告）號: CN114958748A
• 公開（公告）日: 2022-08-30
• 發明（設計）人: 楊婷;王建華;王思怡
• 申請（專利權）人: 東北大學
• 主分類號: C12N5/09
• 分類號: C12N5/09;C12N15/115;C12N15/10;G01N1/40;B82Y5/00;B82Y30/00
• 代理公司: 沈陽東大知識產權代理有限公司 21109
• 代理人: 王思齊

1.一種高效捕獲和無損釋放循環腫瘤細胞的納米磁性親和材料，其特征在于，包括硼酸修飾的磁性氮化碳納米片M-BCN、親和素-生物素化適配體Apt-Avi，所述親和素-生物素化適配體Apt-Avi由生物素化適配體和親和素進行預組裝制備；

所述親和素-生物素化適配體通過親和素的糖基與M-BCN中硼酸配體的定向連接結合，負載到M-BCN上。

2.根據權利要求1所述的高效捕獲和無損釋放循環腫瘤細胞的納米磁性親和材料，其特征在于，所述親和素-生物素化適配體中，生物素化適配體和親和素以4：1的摩爾比例進行預組裝。

3.根據權利要求1所述的高效捕獲和無損釋放循環腫瘤細胞的納米磁性親和材料，其特征在于，所述硼酸修飾的磁性氮化碳納米片M-BCN中，基體材料為磁性g-C₃N₄納米片，修飾的硼酸為羧基苯硼酸。

4.權利要求1至3中任一項所述的高效捕獲和無損釋放循環腫瘤細胞的納米磁性親和材料的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

S1：制備硼酸修飾g-C₃N₄：在干燥條件下，將羧基苯硼酸溶解在溶劑中，加入酰胺縮合劑，之后加入g-C₃N₄粉末進行反應；

反應結束后進行離心分離，取出離心分離得到的沉淀，洗去溶劑和酰胺縮合劑，凍干后獲得硼酸修飾g-C₃N₄；

S2：將硼酸修飾g-C₃N₄剝離成硼酸修飾的氮化碳納米片BCN；

S3：將硼酸修飾的氮化碳納米片BCN制備成硼酸修飾的磁性氮化碳納米片M-BCN；

S4：適配體修飾：將生物素化適配體溶液和親和素溶液經孵育后進行預組裝，之后加入M-BCN，室溫條件下反應，得到負載了親和素-生物素化適配體Apt-Avi的M-BCN，即要制備的納米磁性親和材料，經洗滌后重懸備用。

5.根據權利要求4所述的高效捕獲和無損釋放循環腫瘤細胞的納米磁性親和材料的制備方法，其特征在于，所述步驟S1中，溶劑為N,N-二甲基甲酰胺DMF，酰胺縮合劑為N,N-二異丙基乙胺DIEA和2-(7-氮雜苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯HATU；

羧基苯硼酸：DIEA：HATU的摩爾比例為1:(1-3):(1-1.5)；羧基苯硼酸與g-C₃N₄粉末的質量比例為(3-4):1。

6.根據權利要求5所述的高效捕獲和無損釋放循環腫瘤細胞的納米磁性親和材料的制備方法，其特征在于，所述步驟S1中，洗去溶劑和酰胺縮合劑的方法為：先用DMF清洗以去除HATU；再用乙醇清洗以去除DMF；然后用水洗以去除乙醇；再用稀鹽酸洗以去除DIEA；最后用水洗以去除稀鹽酸和鹽。

7.根據權利要求4所述的高效捕獲和無損釋放循環腫瘤細胞的納米磁性親和材料的制備方法，其特征在于，所述步驟S2中，剝離方法采用超聲輔助液體剝離，液體采用水，超聲功率為600-800W，超聲時間16-20h。

8.根據權利要求4所述的高效捕獲和無損釋放循環腫瘤細胞的納米磁性親和材料的制備方法，其特征在于，所述步驟S3的方法為：將步驟S2獲得的BCN置于水中進行超聲分散，待BCN分散均勻后，加入FeCl₃·6H₂O和FeCl₂·4H₂O，繼續進行超聲分散，將混合液轉移至反應釜中，調節pH，在溫度80-120℃反應1-1.5h，冷卻至室溫，將分離出的固體洗滌后干燥備用；

所述BCN、FeCl₃·6H₂O和FeCl₂·4H₂O的質量比例為2:(2-2.5):(0.8-1)。