[發明專利]一株煙草源耐高溫亞硝酸鹽降解菌及其在雪茄煙葉發酵中的應用

有效

• 申請號: 202210431225.7
• 申請日: 2022-04-22
• 公開（公告）號: CN114621901B
• 公開（公告）日: 2023-08-18
• 發明（設計）人: 王光路;胡希;楊雪鵬;盧玉松;劉春奎;賀遠;劉蘭茜;李乾
• 申請（專利權）人: 鄭州輕工業大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/02;A24B15/20;C02F3/34;A23L5/20;C12R1/01;C02F101/16
• 代理公司: 鄭州市華翔專利代理事務所(普通合伙) 41122
• 代理人: 張愛軍

本發明提供一株煙草源耐高溫亞硝酸鹽降解菌及其在雪茄煙葉發酵中的應用，該菌株的分類命名為Mixta?calida?LYS12，已保藏于中國典型培養物保存中心，保藏編號為CCTCC?NO:M?2022321。該菌株來源于煙草本身，48℃高溫培養下依然具有較好生長特性，亞硝酸鹽耐受濃度可達2g/L，且44℃高溫培養7.5h后，可將1g/L亞硝酸鹽降解97.77％，具有亞硝酸鹽降解速率快等優點。該菌株能夠降低雪茄煙葉發酵過程中的亞硝酸鹽和TSNAs含量，降低雪茄煙對人體的危害。還可降低雪茄煙葉調制過程中產生的亞硝酸鹽，解決雪茄煙葉高溫發酵過程中難以有效應用微生物降解亞硝酸鹽及降低TSNAs含量的問題，對提高雪茄煙制品的安全性及保護消費者健康有著重要的意義。

技術領域

本發明涉及一株煙草源耐高溫亞硝酸鹽降解菌及其在雪茄煙葉發酵中的應用，屬于生物工程領域。

背景技術

亞硝酸鹽，是指含有亞硝酸根離子(NO₂^-)的鹽，常見的有亞硝酸鈉、亞硝酸鉀等。亞硝酸鹽具有防腐性，常在食品加工業被添加在香腸和臘肉中作為保色劑，以維持良好外觀；其次，它可以防止肉毒梭狀芽孢桿菌的產生，提高食用肉制品的安全性。但是，人體吸收過量亞硝酸鹽，會令血液不能運送氧氣，口唇、指尖會變成藍色，即俗稱的“藍血病”，嚴重會令腦部缺氧，甚至死亡。亞硝酸鹽本身并不致癌，但亞硝酸鹽可與氨基酸降解反應，生成有強致癌性的亞硝胺。

目前，亞硝酸鹽降解菌的篩選及應用集中在食品領域，王英等從發酵酸豆角中分離得到了一株具有強降解亞硝酸鹽能力的植物乳桿菌SD-7，該菌株在30℃、亞硝酸鹽濃度200mg/L條件下24h和48h亞硝酸鹽降解率分別為為58.56％、64.56％(植物乳桿菌SD-7的分離鑒定及其亞硝酸鹽降解特性[J].中國食品學報,2016,16(07):97-104)；李霜等從市售泡菜中分離得到一株具有強亞硝酸鹽還原能力的乳酸菌SA-4，該菌株在30℃、亞硝酸鹽濃度150mg/L條件下培養48h后亞硝酸鹽降解率為84.21％(泡菜中亞硝酸鹽降解菌的降解特性及條件優化[J].當代化工研究,2018(09):164-165)。上述研究表明，當前亞硝酸鹽降解菌存在亞硝酸鹽耐受能力差(報道最高耐受濃度為1.1g/L)，培養溫度多為普通中溫培養(超過37℃后亞硝酸鹽降解效率大幅降低)，因此在實際應用時面臨諸多限制。

煙草特有亞硝胺(Tobacco?Specific?N-nitrosamines，TSNAs)是煙草中特有的致癌物質，TSNAs是由亞硝酸鹽及亞硝酸鹽分解產生的氮氧化物(NO、NO₂、N₂O₃)與煙草生物堿發生亞硝化反應產生的，目前已鑒定出的TSNAs主要有8種，其中，N-亞硝基降煙堿(NNN)、4-(N-甲基亞硝基)-1-(3-吡啶基)-1-丁酮(NNK)、N-亞硝基新煙堿(NAT)和N-亞硝基假木賊堿(NAB)是煙草和煙氣中主要的煙草特有亞硝胺。煙葉中煙草特有亞硝胺的含量一般在1μg～10μg之間，相較于烤煙，雪茄煙葉煙堿及其他含氮化合物的含量更高，導致雪茄煙葉更易產生TSNAs，因此，降低雪茄煙葉在高溫發酵過程中TSNAs對提高雪茄煙制品的安全性，保護雪茄煙制品消費者的健康具有重要意義。

發明內容

針對現有技術的不足，本發明的目的是提供一株煙草源耐高溫亞硝酸鹽降解菌及其在雪茄煙葉發酵中的應用，該菌株能夠降低雪茄煙葉發酵過程中的亞硝酸鹽和TSNAs含量，降低雪茄煙對人體的危害。還可以降低雪茄煙葉調制過程中產生的亞硝酸鹽，解決雪茄煙葉高溫發酵過程中難以有效應用微生物降解亞硝酸鹽及降低TSNAs含量的問題，對提高雪茄煙制品的安全性及保護消費者健康有著重要的意義。

為了實現上述目的，本發明所采用的技術方案是：

一株煙草源耐高溫亞硝酸鹽降解菌，所述煙草源耐高溫亞硝酸鹽降解菌的分類命名為Mixta?calida?LYS12，已保藏于中國典型培養物保存中心，保藏日期為2022年3月28日，保藏編號為CCTCC?NO:M?2022321。