[發明專利]抗PIVKA-II單克隆抗體及其應用

有效

• 申請號: 202210427035.8
• 申請日: 2022-04-22
• 公開（公告）號: CN114634576B
• 公開（公告）日: 2023-07-25
• 發明（設計）人: 易維京;趙忠灝;邊穎;蔡方琴;張麗華
• 申請（專利權）人: 中元匯吉生物技術股份有限公司
• 主分類號: C07K16/40
• 分類號: C07K16/40;G01N33/577;G01N33/573
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明涉及生物技術領域，具體涉及抗PIVKA?II單克隆抗體及其應用。公開了一組可以配合使用的PIVKA?II單克隆抗體，本發明PIVKA?II單克隆抗體與PIVKA?II結合具有高特異性和穩定性，應用到試劑盒中可以實現實現對PIVKA?II的高靈敏度、高精密度、寬線性范圍的檢測。

技術領域

本發明涉及生物技術領域，具體涉及抗PIVKA-II單克隆抗體及其應用。

相關申請

本申請要求2021年5月26日提交的申請號CN202110581767.8的優先權，均通過全文提述并入本文。

背景技術

異常凝血酶原(PIVKA-II)，是一種維生素K缺乏誘導蛋白。正常情況下維生素K充足，凝血酶原Gla結構域的10個谷氨酸殘基(Glu)能被γ-谷氨酰羧化酶氧化成γ-羧基谷氨酸(Gla)，使之成為有活性的凝血酶原。當肝臟發生異常時，上述位點的一個或多個Glu殘基羧化不全，從而形成PIVKA?II，喪失凝血活性。因此，PIVKA-II的檢測對于肝臟病變至關重要。

目前已知的蛋白檢測方法較多，例如：放射免疫分析法(RIA)、酶免疫分析法(EIA)、化學發光免疫法(CLEIA)等。但RIA容易受到放射性同位素的輻射影響，EIA靈敏度低、準確性不高,已逐漸被市場淘汰，相對而言，CLEIA因為其簡單的操作和較高的靈敏度逐漸受到關注，成為醫療診斷行業中更佳的選擇。

早期的化學發光檢測PIVKA?II，多采用特異性識別PIVKA?II的抗體與識別凝血酶原的抗體搭配使用，但存在檢測靈敏度較低的問題，為了改善靈敏度，目前多采用多克隆抗體與單克隆抗體混合使用，但多克隆抗體本身特異性不如單克隆抗體，且因為制備批次不同，容易出現批間差，導致檢測精密度降低。所以，高特異性且能配對使用的單克隆抗體，會是化學發光檢測PIVKA?II，甚至其他采用雙抗夾心檢測PIVKA?II方法學的更好選擇，但目前市面上使用的單克隆抗體可選擇性較少，且特異性不夠，亟待開發更多可供選擇的高特異性單克隆抗體。

發明內容

為了解決目前利用雙抗夾心檢測PIVKA?II中存在的靈敏度和精密度不高的問題，本發明公布了高特異性的單克隆抗體，具體如下：

1.抗PIVKA?II單克隆抗體，其特征在于，所述抗PIVKA?II單克隆抗體選自抗體A、抗體B、抗體C或抗體D；

所述抗體D包括：

如SEQ?ID?NO:1所列的重鏈可變區CDR1；

如SEQ?ID?NO:2所列的重鏈可變區CDR2；

如SEQ?ID?NO:3所列的重鏈可變區CDR3；

如SEQ?ID?NO:4所列的輕鏈可變區CDR1；

如SEQ?ID?NO:5所列的輕鏈可變區CDR2和

如SEQ?ID?NO:6所列的輕鏈可變區CDR3；

所述抗體A包括：

如SEQ?ID?NO:7所列的重鏈可變區CDR1；

如SEQ?ID?NO:8所列的重鏈可變區CDR2；

如SEQ?ID?NO:9所列的重鏈可變區CDR3；

如SEQ?ID?NO:10所列的輕鏈可變區CDR1；

如SEQ?ID?NO:11所列的輕鏈可變區CDR2和

如SEQ?ID?NO:12所列的輕鏈可變區CDR3；

所述抗體B包括：

如SEQ?ID?NO:13所列的重鏈可變區CDR1；