[發明專利]一種作物菌核病病原菌核盤菌田間接種及抗性鑒定方法

在審

• 申請號: 202210415837.7
• 申請日: 2022-04-20
• 公開（公告）號: CN114634879A
• 公開（公告）日: 2022-06-17
• 發明（設計）人: 李建廠;李永紅;張振蘭;王灝;郭徐鵬;王美寧;李保軍
• 申請（專利權）人: 陜西省雜交油菜研究中心
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12Q1/18;C12R1/645
• 代理公司: 北京方圓嘉禾知識產權代理有限公司 11385
• 代理人: 任霜

本發明屬于作物病害抗性鑒定技術領域，具體涉及一種作物菌核病病原菌核盤菌田間接種及抗性鑒定方法。本發明利用針狀物連接紙板和載菌糧食顆粒形成接種體，將接種體穿刺接種在作物莖稈上，使載菌糧食顆粒和莖稈接觸，本發明的方法能夠實現快速、精準接種。本發明的核盤菌田間接種方法集多重保濕、微創傷、高活力病原菌為一體，且該方法操作簡單、快速，接種部位靈活，可以精確定株定向，接種效率高，比傳統的接種方法工效提高48.75％，質量高，接種成功率在90％以上，比傳統的接種方法在噴水保濕和不保濕的情況下分別提高56.14％和120.05％，既適合大規模接種的需要，又具有其它接種方法所不具有的優點。

技術領域

本發明屬于作物病害抗性鑒定技術領域，具體涉及一種作物菌核病病原菌核盤菌田間接種及抗性鑒定方法。

背景技術

植物菌核病是一種由核盤菌(Sclerotiniasclerotiorum(Lib.)deBary)寄生引起的嚴重的真菌性病害。核盤菌是世界性分布的重要植物病原菌，是一種兼性寄生真菌，其地理分布、寄主范圍十分廣泛，在五大洲近100多個國家皆有發現或流行，據統計其寄主植物己達75個科，278個屬的408個種和42個亞種或品種的植物，并呈蔓延和增加的趨勢。核盤菌引起的病害對重要經濟作物油菜、向日葵和大豆等的產量和品質構成嚴重威脅。

目前，傳統的植物菌核病防治措施主要依賴于化學防治，忽略了以農業生態系統為整體對象和自然控制因素的作用。農業生態調控技術的一項重要措施就是培育、篩選和利用品種的抗性，研究表明，品種或種質對菌核病的抗性變異是廣泛存在的，因此選育和利用抗病品種對控制該病害的發生和流行具有重要的意義。

在對作物菌核病的抗性研究中，對所鑒種質品種進行人工接菌誘發病害發生是品種抗性鑒定篩選不可缺少的手段和方法，而接種方法對抗性評價結果的可靠性至關重要，一套簡單、易行、準確的鑒定方法尤其是適合大規模篩選作物種質資源的抗性鑒定方法，是開展抗作物菌核病育種工作的基礎。在常規接種鑒定篩選方法上，分為室內接種鑒定和田間接種鑒定。室內接種鑒定操作簡單易行，但鑒定結果與田間真實抗性水平相關性較小。田間接種鑒定反映了田間的實際情況，與自然生產條件一致，因而是抗病材料、品種、種質資源等高級鑒定中所必須采取的方法。田間接種鑒定分為苗期、開花期接種鑒定，目前主要采用開花期接種鑒定。田間接種方法有菌碟接種法、牙簽接種法、菌絲子囊孢子噴霧法和種菌核法，這幾種接種方法中結果雖然在一定程度上能表達抗病品種和感病品種的差異，但是其都有各自的局限性。菌碟接種法人工操作難度較大，費工費時，接種后菌碟易干病原菌失去活性且易脫落，致使接種失敗；牙簽接種法對作物造成的創傷較大，不能真實反映材料的抗性水平，且操作復雜；菌絲子囊孢子噴霧法和種菌核法均受一些條件的限制，接種鑒定不穩定，不適合大規模接種鑒定。目前，缺少一種既能便于操作，又能穩定鑒定作物菌核病。

發明內容

有鑒于此，本發明的目的在于提供一種作物菌核病病原菌核盤菌田間接種及抗性鑒定方法，本發明的方法不僅操作簡便，而且能穩定鑒定作物菌核病。

本發明提供了一種作物菌核病病原菌核盤菌田間接種方法，包括以下步驟：將針狀物穿透紙板和載菌糧食顆粒后，再將針狀物插在待接種作物莖稈陰面，使載菌糧食顆粒和莖稈接觸；所述載菌糧食顆粒的表面負載有核盤菌。

優選的，所述針狀物包括大頭針。

優選的，所述紙板的形狀為方形，每個所述紙板的長度為1.2～1.5cm、寬度為1.2～1.5cm、厚度為0.3～0.5cm。

優選的，所述載菌糧食顆粒包括載菌小麥粒。

優選的，所述穿透載藥糧食顆粒為從載菌小麥粒的腹溝中間穿過。

優選的，所述針狀物插在待接種作物莖桿上的深度為0.5～0.8cm。