[發明專利]一種南美樹蛙抗癌肽DMS-PS1及其應用

有效

• 申請號: 202210401513.8
• 申請日: 2022-04-18
• 公開（公告）號: CN114835791B
• 公開（公告）日: 2023-05-30
• 發明（設計）人: 高藝恬;郭允峰;羅曉焱;吳迪;李曉坤
• 申請（專利權）人: 溫州大學
• 主分類號: C07K14/46
• 分類號: C07K14/46;C12N15/12;A61K38/17;A61P35/00
• 代理公司: 溫州聯贏知識產權代理事務所(普通合伙) 33361
• 代理人: 慈程麟

本發明公開了一種南美樹蛙抗癌肽DMS?PS1及其應用，它可以用于抗癌藥物和保健品以及制備領域，以南美樹蛙Phy?l?lomedusasauvagi?i作為材料，從蛙皮分泌物中分離得到了一條新型的天然抗癌肽DMS?PS1，多肽的開放閱讀框均由76個氨基酸組成、含有高度保守的由22個氨基酸殘基組成的信號肽、富含天冬氨酸和谷氨酸等酸性氨基酸，其分子量為2931.43道爾頓，C端含有酰胺化修飾，是具有α?螺旋結構的兩親性陽離子肽，本發明的公開了該天然抗癌肽DMS?PS1表現出光譜抗癌活性，且對前列腺癌細胞表現出一定的殺傷選擇性，研究發現其通過誘導PC?3細胞凋亡發生抗癌作用，這為癌癥的治療提供了潛在的藥物。

技術領域

本發明涉及抗癌藥物及其制備領域，具體涉及一種南美樹蛙抗癌肽DMS-PS1及其應用。

背景技術

現代醫療、科學科技和經濟的迅速發展使得人們的生活方式發生了巨大的改變，人均壽命延長、環境污染等問題也使得惡性腫瘤的發病率和死亡率逐漸升高，成為威脅人類生命的第二大疾病。根據全球癌癥報告結果顯示，到2020年為止，全世界惡性腫瘤病例大約有1930萬，死亡率約為1000萬。盡管近年來癌癥治療已經取得了重大進展，但目前用于癌癥治療的主要方式仍比較局限。另外癌癥靶向藥的研究和應用也越來越多，但化療藥物往往具有毒副作用強和易產生耐藥性等缺點。所以急需尋找和開發新型的抗癌藥物。

蛙皮和分泌物的存在一直被認為是青蛙抵御捕食者或者保護自身免受環境中微生物入侵的第一道屏障。從青蛙皮膚中分離的宿主防御肽具有廣闊的應用前景，因其具有殺菌、抗癌和免疫調節等多種生物活性而備受關注。

發明內容

本發明的目的在于提供一種從南美樹蛙Phyllomedusasauvagii蛙皮分泌物中分離鑒定出一條具有抗癌活性的生物活性肽，并確定體外結果發現抗癌肽DMS-PS1能夠抑制人非小細胞肺腺癌H157細胞、人星形膠質瘤U251MG細胞、人乳腺癌MB-435S細胞、前列腺癌PC-3細胞的增值，并對前列腺癌PC-3細胞表現出一定的選擇性，能夠誘導PC-3細胞的凋亡。

為了實現以上目的，本發明采用的技術方案為：以南美樹蛙蛙皮分泌物為研究對象，通過揉搓結合電擊法來獲得蛙皮分泌物，通過分子克隆可獲得多肽的轉錄本、核苷酸序列以及相應的翻譯氨基酸序列顯示，其翻譯的開放閱讀框由76個氨基酸殘基組成，是由22個殘基組成的高度保守的信號肽區域、含有天冬氨酸和谷氨酸殘基的酸性區域以及一個由28個氨基酸殘基組成的成熟肽區域；來自蛙皮分泌物文庫的編碼DMS-PS1的cDNA的核苷酸序列和翻譯的ORF氨基酸序列為：

進一步的，使用質譜技術進一步驗證成熟肽的分子量和一級結構，確定本肽的分子量為2931.43道爾頓，C端含有酰胺化修飾，其氨基酸序列為：GLWKSLFKNVGKAAGKAALNAVTDMVNQ-NH2。

進一步的，采用體外篩選發現其能夠抑制人非小細胞肺腺癌H157細胞、人星形膠質瘤U251MG細胞、人乳腺癌MB-435S細胞、前列腺癌PC-3細胞的增值，并對前列腺癌PC-3細胞表現出一定的選擇性，能夠誘導PC-3細胞的凋亡。因此，所述南美樹蛙抗癌肽DMS-PS1可作為制備潛在的抗癌藥物。

附圖說明

圖1為本發明的抗癌肽DMS-PS1癌細胞殺傷測定吸光度示圖。

圖2為本發明的抗癌肽DMS-PS1癌細胞膜完整性作用測定示圖。

圖3為本發明抗癌肽DMS-PS1細胞凋亡實驗檢測結果示圖。

具體實施方式

為了能夠更清楚地理解本發明的上述目的、特征和優點，下面結合附圖和具體實施方式對本發明進行進一步的詳細描述。需要說明的是，在相互不沖突的情況下，本申請的實施例及實施例中的特征可以相互組合。

實施例：