[發(fā)明專(zhuān)利]用于雞胚卵內(nèi)注射的微生態(tài)制劑及其制備方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202210399929.0
• 申請(qǐng)日: 2022-04-15
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN114917256A
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-08-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 于美玲;李元昊;魏紫;龐舒琪;梁穎;王鵬程;姜立山;陳立思;胡庭俊;韋英益;何家康;陳海蘭;王秋華;唐小川
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 廣西大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): A61K35/747
• 分類(lèi)號(hào): A61K35/747;A61P1/00;A61P43/00;C12N1/20;C12R1/01;C12R1/225;A61K35/745;A61K31/733
• 代理公司: 廣西南寧公平知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 45104
• 代理人: 黃宗全

1.一種用于雞胚卵內(nèi)注射的微生態(tài)制劑，其特征在于主要包括益生元和復(fù)合微生物；所述益生元為菊粉，所述復(fù)合微生物主要由雙歧桿菌和約翰遜乳桿菌組成。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于雞胚卵內(nèi)注射的微生態(tài)制劑，其特征在于：所述約翰遜乳桿菌分離自黃羽肉雞腸道。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于雞胚卵內(nèi)注射的微生態(tài)制劑，其特征在于：所述益生元的質(zhì)量份和復(fù)合微生物的活菌數(shù)量份分別為1份和1份。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的用于雞胚卵內(nèi)注射的微生態(tài)制劑，其特征在于：所述益生元的質(zhì)量是1.76mg/份。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的用于雞胚卵內(nèi)注射的微生態(tài)制劑，其特征在于：所述復(fù)合微生物中活菌數(shù)為2.2×10⁶CFU/份。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的用于雞胚卵內(nèi)注射的微生態(tài)制劑，其特征在于：所述雙歧桿菌和約翰遜乳桿菌的活菌數(shù)量比為0.1:1。

7.權(quán)利要求1所述微生態(tài)制劑的制備方法，其特征在于包括以下步驟：

1)配制BS液體培養(yǎng)基和MRS液體培養(yǎng)基，115℃高壓滅菌15min；

2)將動(dòng)物源雙歧桿菌按照2％的比例接種于10mL BS液體培養(yǎng)基中，置于37℃培養(yǎng)箱中，靜置、厭氧培養(yǎng)18h；

3)將雞源約翰遜乳桿菌按照2％的比例接種于10mL MRS液體培養(yǎng)基中，置于37℃培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)18h；

4)將上述細(xì)菌培養(yǎng)物分別使用4℃離心機(jī)，3000×g離心10min，棄掉上清液，分別得到雙歧桿菌和約翰遜乳桿菌菌體沉淀；利用5mL預(yù)冷的PBS溶液重懸菌體沉淀，4℃、3000×g離心10min，棄掉上清液；利用5mL PBS溶液重懸菌體沉淀，應(yīng)用麥?zhǔn)媳葷岱ㄕ{(diào)整菌濃度為1×10⁸CFU/mL 4℃保存，備用；

5)按照配方稱(chēng)取17.6mg菊粉，溶于1.5mL PBS溶液中，經(jīng)0.45μm無(wú)菌濾器過(guò)濾除菌，4℃保存，備用；

6)將步驟4)所得雙歧桿菌菌液、約翰遜乳桿菌菌液以及步驟5)所得菊粉溶液和無(wú)菌PBS溶液按1:10:75:14比例混合到一起制成微生態(tài)制劑，每份微生態(tài)制劑體積為200μL，其中菊粉的質(zhì)量是1.76mg/份，復(fù)合微生物的活菌數(shù)為2.2×10⁶CFU/份，且雙歧桿菌和約翰遜乳桿菌的活菌數(shù)量比為0.1:1。