[發(fā)明專利]一種滅活疫苗候選株的外源因子檢測方法以及滅活疫苗候選株的篩選和滅活疫苗的制備

在審

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• 申請日: 2022-04-15
• 公開（公告）號: CN114774585A
• 公開（公告）日: 2022-07-22
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 張嚴峻;孫逸;茅海燕;周飚烽
• 申請（專利權(quán)）人: 浙江省疾病預防控制中心
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/689;C12Q1/6869;A61K39/215;A61P31/14;C12R1/93;C12R1/35
• 代理公司: 北京超凡宏宇專利代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 11463
• 代理人: 覃蛟

本發(fā)明公開了一種滅活疫苗候選株的外源因子檢測方法以及滅活疫苗候選株的篩選和滅活疫苗的制備，涉及生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，本發(fā)明基于高通量測序技術(shù)的宏基因組測序的手段，基于候選株中病原豐度和外源因子豐度對候選株進行篩選，能夠更有效地檢測外源因子的引入，為滅活疫苗的安全性提供了有利保障，且該方法具備高效、快捷的特點，適用于推廣。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體而言，涉及一種滅活疫苗候選株的外源因子檢測方法以及滅活疫苗候選株的篩選和滅活疫苗的制備。

背景技術(shù)

制備滅活疫苗，需要對候選株進行遺傳背景篩查以及外源因子檢測，傳統(tǒng)的檢測外源因子的方法，是通過支原體引物進行PCR擴增，采用電泳凝膠成像系統(tǒng)進行目標產(chǎn)物的確認，只能定性分析是否該樣本含有相應(yīng)的支原體。而一般情況下，普通PCR的靈敏度較低(1000拷貝/毫升)。無法有效快速地實現(xiàn)對于外源因子的檢測。

鑒于此，特提出本發(fā)明。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種滅活疫苗候選株的外源因子檢測方法以及滅活疫苗候選株的篩選和滅活疫苗的制備。

本發(fā)明是這樣實現(xiàn)的：

第一方面，本發(fā)明實施例提供了一種滅活疫苗候選株的外源因子檢測方法，其包括：分別對多株候選株的細胞培養(yǎng)物進行宏基因組測序，獲得候選株的病原豐度和外源因子豐度；分別對多株候選株的病原豐度和外源因子豐度按照數(shù)值大小進行排序，將病原豐度值≥N％的候選株且外源因子豐度值≤M％的候選株的毒株進行保留，用于后續(xù)篩選或滅活疫苗的開發(fā)，N 和M均為50～99。

第二方面，本發(fā)明實施例提供了一種滅活疫苗候選株的篩選方法，其包括：采用如前述實施例所述的滅活疫苗候選株的外源因子檢測方法對候選株進行過濾。

第三方面，本發(fā)明實施例還提供了一種滅活疫苗的制備方法，其包括：采用如前述實施例所述的滅活疫苗候選株的篩選方法獲得的候選株進行滅活疫苗的制備。

本發(fā)明具有以下有益效果：

本發(fā)明基于高通量測序技術(shù)的宏基因組測序的手段，基于候選株中病原豐度和外源因子豐度對候選株進行篩選，能夠更有效地檢測外源因子的引入，為滅活疫苗的安全性提供了有利保障，且該方法具備高效、快捷的特點，適用于推廣。

具體實施方式

為使本發(fā)明實施例的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點更加清楚，下面將對本發(fā)明實施例中的技術(shù)方案進行清楚、完整地描述。實施例中未注明具體條件者，按照常規(guī)條件或制造商建議的條件進行。所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者，均為可以通過市售購買獲得的常規(guī)產(chǎn)品。

首先，本發(fā)明實施例提供了滅活疫苗候選株的外源因子檢測方法，其包括以下步驟：

分別對多株候選株的細胞培養(yǎng)物進行宏基因組測序，獲得候選株的病原豐度和外源因子豐度；

分別對多株候選株的病原豐度和外源因子豐度按照數(shù)值大小進行排序，將病原豐度值≥N％的候選株且外源因子豐度值≤M％的候選株的毒株進行保留，用于后續(xù)篩選或滅活疫苗的開發(fā)，N和M均為50～99。

本文中的“外源因子檢測方法”可以理解為針對外源因子進行檢測，并基于檢測結(jié)果進行過濾，尤其適用于存在多株候選株的情況下，通過病原豐度和外源因子的豐度，過濾掉外源因子引入較多的候選株，有效實現(xiàn)候選株的篩選，進一步提高篩選株的安全性和有效性，避免了篩選制備滅活疫苗后再出現(xiàn)安全性和有效性的問題，縮短了滅活疫苗制備的成本和時間。

本文中“候選株的細胞培養(yǎng)物”是指將候選株接種于細胞中進行培養(yǎng)，從而獲得的培養(yǎng)物，接種方法和培養(yǎng)方法均可以參照現(xiàn)有公開的技術(shù)獲得，不再贅述。