[發明專利]一種鑒定極低需冷量桃種質資源的方法

有效

• 申請號: 202210391413.1
• 申請日: 2022-04-14
• 公開（公告）號: CN114740114B
• 公開（公告）日: 2023-05-26
• 發明（設計）人: 萬保雄;陸泰良;李海炎;朱鵬翔;梁瑞鄭;陽愛民;李怡杰
• 申請（專利權）人: 廣西特色作物研究院
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/86
• 代理公司: 廣西中知科創知識產權代理有限公司 45130
• 代理人: 湯凌志

本發明公開了一種鑒定極低需冷量桃種質資源的方法，根據桃花芽中脫落酸(ABA)含量在解除休眠前保持較高水平，在解除休眠后急劇下降的情況，本發明主要是在冬季大量落葉期前后15d采用測定花芽中脫落酸含量的方法鑒定區分極低需冷量(300h)桃種質資源。

【技術領域】

本發明屬于植物育種技術領域，具體涉及一種鑒定極低需冷量桃種質資源的方法。

【背景技術】

桃(Prunus?persica?L.)是薔薇科(Rosaceae)、李屬(Prunus?L.)、桃亞屬(Amygdalus?L.)的多年生中型喬木。原產于我國陜西、甘肅、西藏等西部冷涼地區，需要一定的需冷量完成休眠才能進入雌雄性細胞分化階段。需冷量是指打破落葉果樹自然休眠所需的有效低溫時數，一般以氣溫≤7.2℃為計算起點。當桃樹需冷量不能滿足時，萌芽不整齊且花期長，花而不實，產量得不到保證。因此，需冷量是南方桃種植成功與否的關鍵因素之一。目前，按需冷量高低來分類，桃可分為極低需冷量(300h)、低需冷量(300-600h)、中需冷量(600-900h)、高需冷量(900-1200h)、極高需冷量(1200h)5個等級。

目前已有相關的研究，例如中國專利申請號201410264421.5公開了快速測定桃需冷量的方法，在桃落葉后，每隔4-5天采桃當年生枝條3-5枝，枝條長20-30cm，每個桃品種枝條上花芽葉芽各不少于20個，枝條在室內插入水中2-3cm，每隔3天剪一次桃枝條下部露出新茬，每隔三天換水清潔處理一次，室內溫度白天23-25℃，晚上15-17℃，時間為白/黑＝14/10h，濕度60-70％，枝條光照強度2500LX，以葉芽露頂50％和花芽頂部綻開50％代表其花芽和葉芽滿足其自身需冷量；再輔以需冷量模型來統計需冷量，進而測定出桃的需冷量。

又例如中國專利申請號202111261417.X公開了一種基于qRT-PCR檢測方法快速測算桃品種需冷量的方法，步驟如下：(一)PpDAM5基因相對表達量的檢測；(二)PpDAM5基因相對表達量與需冷量的等級劃分；(三)待測桃品種快速測算；該方法以已確定需冷量品種作為標準物，選取桃品種落葉時葉片進行PpDAM5基因表達量測定，建立需冷等級劃分模型，將需冷量待測桃新品種進行PpDAM5基因相對表達量檢測，然后根據建立的需冷量等級劃分模型進行匹配，可以初步快速測算待測桃品種需冷量。

總的來說，桃需冷量的測定方法主要有以下幾種：

(1)水培法：冬季落葉后每隔3-5d剪取當年生枝條10-20根插入深2-3cm水中，放置于人工氣候箱，21d后統計萌芽率，當萌芽率超過50％時表示需冷量得到滿足，同時統計期間氣溫低于7.2℃的小時數即為該品種的需冷量；

(2)對照品種法：利用一系列對照品種測定待測品種的需冷量，在國外普遍應用，從田間每隔7d同時采樣待測桃品種和對照桃品種(方法同水培法)，在溫室中21d后，比較所測定品種與對照品種萌芽率，則可知測定品種的需冷量；

(3)分子標記鑒定：2019年，中國農業科學院鄭州果樹研究所桃課題組采用分子標記技術鑒定。

上述方法的缺陷是：一是在人工氣候條件下進行測定，枝條剪下后處于離體狀態，無法完全模擬田間自然條件，營養物質運輸與萌芽均受到一定影響，從而導致測定結果誤差較大；二是工作量大，效率低；三是采用分子標記技術只能鑒定區分500h以上的桃種質資源，500h以下品種無法區分。

【發明內容】

針對以上現有技術的不足，本發明提供了一種鑒定極低需冷量桃種質資源的方法，根據桃花芽中脫落酸含量在大量落葉期保持穩定水平，本發明主要通過測定大量落葉期桃花芽中脫落酸含量鑒定區分極低需冷量(300h)桃種質資源。

本發明的目的通過以下技術方案實現：

一種鑒定極低需冷量桃種質資源的方法，包括如下步驟：

1)選取生長健康的不同需冷量桃種質資源；