[發明專利]西拉菌素在制備治療冠狀病毒感染性疾病的藥物的用途

有效

• 申請號: 202210386551.0
• 申請日: 2021-02-08
• 公開（公告）號: CN114657149B
• 公開（公告）日: 2023-10-20
• 發明（設計）人: 童貽剛;范華昊;宋立華;安小平;王立欽;劉文麗;劉振東
• 申請（專利權）人: 北京化工大學
• 主分類號: C12N7/00
• 分類號: C12N7/00;C12Q1/70;C12R1/93
• 代理公司: 北京知元同創知識產權代理事務所(普通合伙) 11535
• 代理人: 彭勁松

本發明提供一種從穿山甲中分離的冠狀病毒，命名為穿山甲冠狀病毒xCoV，其與SARS?COV?2的S蛋白同源性達92.5％，xCoV感染細胞的受體與SARS?COV?2一致，均為血管緊張素轉化酶2(ACE2)。但xCoV不感染人，因此對人而言是非常安全的，可用于抗SARS?COV?2病毒的活性藥物、疫苗的篩選，還可用于制備抗SARS?COV?2病毒的減毒疫苗或滅活疫苗。基于該穿山甲冠狀病毒xCoV，篩選獲得了多個具有抗冠狀病毒活性的活性化合物，并對其中的千金藤素(千金藤堿)、西拉菌素、鹽酸甲氟喹(甲氟喹)進行了EC₅₀、CC₅₀及SI的評價，并通過轉錄組測序分析研究了千金藤素抑制xCoV的機制。

本申請為2021年02月08日提交的，發明名稱為“穿山甲冠狀病毒xCoV及其應用和藥物抗冠狀病毒感染的應用”的中國專利申請202110172158.7的分案申請。

技術領域

本發明屬于藥物領域，具體涉及一種穿山甲冠狀病毒xCoV及其用于抗SARS-COV-2病毒藥物的篩選的用途，包含該穿山甲冠狀病毒xCoV的藥物篩選模型、藥物篩選方法，還涉及基于該xCoV篩選出的活性化合物用于制備治療SARS-COV-2病毒感染性疾病的藥物的用途。

背景技術

新型冠狀病毒(被世界衛生組織命名為“SARS-COV-2”，先前命名為2019新型冠狀病毒或2019nCoV)屬于β屬冠狀病毒，有包膜，顆粒呈圓形或橢圓形，常為多形性，直徑60-140nm。其基因特征與SARS-CoV和MERS-CoV有明顯區別。目前研究顯示其與蝙蝠SARS樣冠狀病毒(bat-SL-CoVZC45)同源性達85％以上。SARS-CoV-2的防治迫切需要有效的疫苗和特異性治療，如何快速篩選能夠抑制該病毒復制的藥物成為迫在眉睫的問題。同時，由于該病毒的傳染性極強，如何安全地進行藥物篩選等相關研究、保護研究人員不受感染也成為亟待解決的問題。

發明內容

本發明人從海關查獲的死亡的穿山甲中分離并培養的一株新型冠狀病毒xCoV，稱為穿山甲冠狀病毒xCoV(在本發明的上下文中也稱為“穿山甲xCoV”或者“xCoV”)，其全基因組序列分析結果顯示與SARS-COV-2的S蛋白同源性達92.5％，是迄今為止成功分離培養的與SARS-COV-2的S蛋白同源性最高的病毒。進一步實驗顯示穿山甲xCoV感染細胞的受體與SARS-COV-2一致，均為血管緊張素轉化酶2(ACE2)。但是該病毒不感染人，因此，對人而言是非常安全的。

本發明提供一種冠狀病毒(也稱為“穿山甲冠狀病毒xCoV”、“穿山甲xCoV”或者“xCoV”)，該冠狀病毒毒株xCoV于2020年2月14日保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(地址：北京市朝陽區北辰西路1號院3號，中國科學院微生物研究所)，保藏編號為CGMCC No.19295。

根據本發明的穿山甲冠狀病毒毒株xCoV，其全基因組核苷酸序列如序列表中SEQID NO:1所示。

根據本發明的穿山甲冠狀病毒毒株xCoV，其S基因的核酸序列如序列表中SEQ IDNO:2所示。

根據本發明的穿山甲冠狀病毒毒株xCoV，其S蛋白的氨基酸序列如序列表中SEQID NO:3所示。

根據本發明的穿山甲冠狀病毒毒株xCoV，其與SARS-COV-2的S蛋白同源性達92.5％。其中，所述SARS-COV-2的S基因的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:4所示，其S蛋白的氨基酸序列如序列表中SEQ ID NO:5所示。

其中，xCoV與SARS-COV-2的序列一致性結果在圖1中示出。