[發明專利]一種靶向CD155的CAR結構設計及其應用

在審

• 申請號: 202210384799.3
• 申請日: 2022-04-13
• 公開（公告）號: CN114957483A
• 公開（公告）日: 2022-08-30
• 發明（設計）人: 張凱;張根豪
• 申請（專利權）人: 鄭州大學第三附屬醫院（河南省婦幼保健院）
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C12N15/867;C12N15/64;C12N5/10;C12N15/62;A61K39/00;A61P35/00
• 代理公司: 鄭州聯科專利事務所(普通合伙) 41104
• 代理人: 張曉萍

本申請屬于腫瘤免疫治療技術領域，具體涉及一種靶向CD155的CAR結構設計及其應用專利申請事宜。該CAR序列包括依次連接的人源TIGIT胞外區序列、CD8信號傳導片段、以及CD28或41BB刺激信號分子，結構式分別命名為：CD155?28z?CAR或者CD155?BBz?CAR。本申請中，發明人以CD155作為目標靶點，設計了新的CAR結構?；诖薈AR結構設計，發明人進一步制備了靶向CD155的重組慢病毒表達質粒，進一步地T細胞轉染和相關初步實驗結果表明，相關CAR結構設計能有效刺激腫瘤細胞產生大量效應因子IL?2和IFN?γ，表明該CAR結構對相關腫瘤尤其是實體瘤的防治具有較好應用前景。

技術領域

本申請屬于腫瘤免疫治療技術領域，具體涉及一種靶向CD155的CAR（ChimericAntigen Receptor，嵌合抗原受體）結構設計及其應用專利申請事宜。

背景技術

腫瘤防治中，基于免疫系統的CAR-T（Chimeric Antigen Receptor T-Cell，嵌合抗原受體T細胞）治療方式，因其副作用小、適應癥廣泛等技術優勢，近年來得到了較多研究和發展。

現有技術中，以CD19為靶點，利用CAR-T細胞來定向清除CD19⁺腫瘤細胞已在非實體瘤的急性淋巴細胞白血病(ALL)的治療中表現出較好防治效果。但是CAR-T技術在實體瘤中的應用目前尚不盡人意，還有許多問題需要解決，其中一個重要技術問題就是尋找在實體腫瘤中特異表達的靶點抗原。

針對細胞表面表達分子相關研究表明，CD155作為一種免疫球蛋白樣粘附分子，屬于Nectin樣分子家族中的第五個成員，其參與了細胞運動、自然殺傷和T細胞以及NK細胞介導的免疫過程。作為共刺激受體CD226和天然殺傷細胞和T細胞上的共抑制受體TIGIT和CD96的配體，CD155通過與包括TIGIT、CD226和CD96在內的多種配體相互作用在免疫中發揮雙重作用。

已有研究表明，CD155在人的各種正常組織中很少或弱表達，但在多種人類惡性腫瘤中存在過度表達現象，對腫瘤的增殖轉移有明顯的促進作用，并與患者不良預后相關。基于這一特點，將CD155作為目標靶點，進而開發一種CAR-T細胞治療方法，則有望拓展CAR-T技術在實體瘤治療中的應用范圍以及進一步改善腫瘤的治療效果是具有十分重要的技術意義的。

發明內容

針對CD155靶點，本申請目的在于提供一種新的CAR結構設計，從而為相關實體瘤的防治奠定一定技術基礎。

本申請所采取的技術方案詳述如下。

一種靶向CD155的CAR結構設計，該CAR序列包括依次連接的人源TIGIT胞外區序列、CD8信號傳導片段、以及CD28或41BB刺激信號分子，具體結構式分別命名為：CD155-28z-CAR或者CD155-BBz-CAR；具體說明如下。

（1）CD155-28z-CAR結構：

包括依次連接的：人CD8a分子信號肽(Leading signal，CD8a)、人源TIGIT胞外區（人源CD155胞外區）、人CD8a分子柔性片段(CD8Hinge)、人CD28分子跨膜區與胞內區(CD28)，人CD3z分子胞內區(CD3z)；其蛋白總長為388個氨基酸，具體氨基酸序列如SEQ IDNo.1所示，具體如下：