[發(fā)明專利]一種胡子鲇性別特異性分子標(biāo)記引物及其應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202210381377.0
• 申請日: 2022-04-12
• 公開（公告）號: CN114657264A
• 公開（公告）日: 2022-06-24
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 田昌緒;沈奕君;林星樺;周大顏;潘炎楊;鄭顯龍;李廣麗;朱春華;廖愚;肖珊
• 申請（專利權(quán)）人: 廣東海洋大學(xué);廣西壯族自治區(qū)水產(chǎn)引育種中心
• 主分類號: C12Q1/6888
• 分類號: C12Q1/6888;C12Q1/6879;C12Q1/686;C12N15/11
• 代理公司: 廣州知友專利商標(biāo)代理有限公司 44104
• 代理人: 宣國華;劉艷麗

1.一種胡子鲇性別特異性分子標(biāo)記引物，其特征是：所述引物為引物NP544，所述引物NP544包括正向引物NP544-F和反向引物NP544-R，所述正向引物NP544-F的堿基序列如SEQID NO：1所示，所述反向引物NP544-R的堿基序列如SEQ ID NO：2所示。

2.一種用于胡子鲇性別鑒定的試劑盒，其特征是：所述試劑盒包括權(quán)利要求1中的引物。

3.一種胡子鲇性別鑒定方法，其特征是：在雌雄個(gè)體的基因組DNA中采用PCR擴(kuò)增出特異性片段，具體包括：合成權(quán)利要求1中的引物，提取待測胡子鲇的基因組DNA，采用權(quán)利要求1中的引物，以基因組DNA為模板，進(jìn)行PCR擴(kuò)增，采用毛細(xì)管電泳法檢測擴(kuò)增產(chǎn)物，根據(jù)測序峰型結(jié)果鑒定雌雄個(gè)體，其中雜合峰型為雄性個(gè)體，純合峰型為雌性個(gè)體。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的胡子鲇性別鑒定方法，其特征是：PCR擴(kuò)增時(shí)采用的PCR反應(yīng)體系為：30ng/μL DNA模板1.0μL，2×Taq MasterMix 12.5μL，10mM正向引物NP544-F和反向引物NP544-R各0.5μL，ddH₂O 10.5μL，總共25μL。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的胡子鲇性別鑒定方法，其特征是：PCR擴(kuò)增時(shí)采用的PCR反應(yīng)程序?yàn)椋?4℃預(yù)變性5min，94℃變性30sec，58℃退火30sec，72℃延伸30sec，循環(huán)35次，72℃延伸10min。

6.權(quán)利要求1所述的引物或權(quán)利要求2所述的試劑盒或權(quán)利要求3-5任一項(xiàng)所述的方法在胡子鲇性別鑒定方面的應(yīng)用。