[發明專利]一種高產氨基葡萄糖的解淀粉芽孢桿菌工程菌株及其應用

有效

• 申請號: 202210377397.0
• 申請日: 2022-04-11
• 公開（公告）號: CN114836361B
• 公開（公告）日: 2023-09-12
• 發明（設計）人: 邱益彬;丁振中;管平海;方祥;高小燕;徐俊山
• 申請（專利權）人: 揚州日興生物科技股份有限公司
• 主分類號: C12N1/21
• 分類號: C12N1/21;C12N15/55;C12N15/56;C12N15/75;C12P19/26;C12P19/02;C12R1/07
• 代理公司: 南京智轉慧移知識產權代理有限公司 32649
• 代理人: 朱進

1.一種高產氨基葡萄糖的解淀粉芽孢桿菌工程菌株，其特征在于，以模式菌株解淀粉芽孢桿菌DMS7為基礎，通過游離質粒表達含有淀粉酶基因的信號肽的核苷酸序列的密碼子優化的N-乙酰氨基葡萄糖脫乙酰酶基因，所述淀粉酶基因的信號肽的核苷酸序列如SEQ?IDNO.1所示，所述密碼子優化的N-乙酰氨基葡萄糖脫乙酰酶基因的核苷酸序列如SEQ?IDNO.2所示，所述淀粉酶基因的信號肽的核苷酸序列連接在N-乙酰氨基葡萄糖脫乙酰酶基因的N端。

2.根據權利要求1所述的高產氨基葡萄糖的解淀粉芽孢桿菌工程菌株，其特征在于，所述游離質粒為質粒pMA5。

3.權利要求1所述的高產氨基葡萄糖的解淀粉芽孢桿菌工程菌株在制備氨基葡萄糖中的應用。

4.根據權利要求3所述的應用，其特征在于，將高產氨基葡萄糖的解淀粉芽孢桿菌工程菌株活化后，接種到LB培養基，恒溫震蕩條件下培養至OD₆₆₀大于3.0，得到種子液；將種子液以2-10％的接種量接種于含有N-乙酰氨基葡萄糖底物的發酵培養基，恒溫震蕩條件下進行逐級放大發酵培養，得到氨基葡萄糖。

5.根據權利要求4所述的應用，其特征在于，所述恒溫震蕩條件為30～37℃、100～250rpm。

6.根據權利要求4所述的應用，其特征在于，所述發酵培養基的配方為：牛肉膏1.0g/L、蛋白胨5.0g/L、玉米粉2.0g/L、氯化鈉5.0g/L、磷酸氫二鉀1.0g/L、硫酸鎂0.5g/L。

7.根據權利要求4所述的應用，其特征在于，N-乙酰氨基葡萄糖底物的濃度為40g/L。

8.含有權利要求1所述的高產氨基葡萄糖的解淀粉芽孢桿菌工程菌株的發酵液，其特征在于，所述發酵液的制備工藝如下：將高產氨基葡萄糖的解淀粉芽孢桿菌工程菌株接種在發酵培養基中，在30～37℃、100～250rpm條件下培養，得到高產氨基葡萄糖的解淀粉芽孢桿菌工程菌株的發酵液。