[發明專利]一種制備高純度半乳糖二酸的方法

在審

• 申請號: 202210376891.5
• 申請日: 2022-04-11
• 公開（公告）號: CN114934079A
• 公開（公告）日: 2022-08-23
• 發明（設計）人: 華夏;徐勇;周鑫;韓健;張宸琿
• 申請（專利權）人: 南京林業大學
• 主分類號: C12P7/58
• 分類號: C12P7/58;C12N13/00;C12N1/20;C12R1/01
• 代理公司: 南京智轉慧移知識產權代理有限公司 32649
• 代理人: 王偉

1.一種制備高純度半乳糖二酸的方法，其特征在于，包括以下步驟：

1)以果膠為底物，采用果膠酶進行酶水解生產制備半乳糖醛酸；

2)實時監測反應體系中半乳糖醛酸生成量，至反應體系中半乳糖醛酸的濃度不再增加停止反應，離心酶解液后將上清液轉移至雙極膜電滲析系統的料室中進行分離純化；

3)當電滲析系統鹽室中電導率將至100～200μs/cm時，分離過程完成；將酸室中的溶液轉移至生物反應器中，并接入氧化葡萄糖酸桿菌進行靜息細胞催化生產獲得高純度半乳糖二酸溶液。

2.根據權利要求1所述的制備高純度半乳糖二酸的方法，其特征在于，果膠的濃度為4～5g/L。

3.根據權利要求1所述的制備高純度半乳糖二酸的方法，其特征在于，果膠酶的用量為底物質量的4％～5％。

4.根據權利要求1所述的制備高純度半乳糖二酸的方法，其特征在于，酶水解反應條件為：控制反應溫度為50～55℃，pH為3.8～4.2。

5.根據權利要求1所述的制備高純度半乳糖二酸的方法，其特征在于，控制電滲析設備電壓20～30V，電流5A以下。

6.根據權利要求1所述的制備高純度半乳糖二酸的方法，其特征在于，氧化葡萄糖酸桿菌的接入量為8～10g/L。

7.根據權利要求1所述的制備高純度半乳糖二酸的方法，其特征在于，靜息細胞階段反應條件為：控制反應溫度為28～30℃，攪拌轉速為500～550rpm，pH為4.0～4.5。

8.根據權利要求1所述的制備高純度半乳糖二酸的方法，其特征在于，包括以下步驟：

1)在震蕩反應體系中，加入4g/L的底物基質果膠，接入4％果膠酶進行酶水解生產半乳糖醛酸混合液；實時監測反應體系中半乳糖醛酸生成量，并通過氫氧化鈉控制反應pH 3.8～4.2；

(2)至震蕩反應體系中半乳糖醛酸的濃度不再增加停止反應，離心酶解液后將上清液轉移至雙極膜電滲析系統的料室中進行分離純化，至電滲析系統鹽室中電導率將至100～200μs/cm時，分離過程完成，于酸室獲得高純度半乳糖醛酸溶液；

(3)將酸室中的半乳糖醛酸溶液轉移至1L生物反應器中，并接入10g/L氧化葡萄糖酸桿菌進行靜息細胞催化生產半乳糖二酸；實時監測反應體系中半乳糖二酸生成量，并控制反應體系pH 4.0～4.5。

9.一種制備高純度半乳糖二酸的方法，其特征在于：以半乳糖醛酸為底物，接入氧化葡萄糖酸桿菌進行靜息細胞催化，生產獲得高純度半乳糖二酸溶液；其中，反應條件為：反應溫度28～30℃，攪拌轉速為500～550rpm，pH為4.0～4.5。