[發(fā)明專利]一種海藻糖的生產(chǎn)方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202210362640.1
• 申請日: 2022-04-08
• 公開（公告）號: CN114438072B
• 公開（公告）日: 2022-05-31
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李素英;趙培培;唐春暉;張堃;桑元麗;李蕾;劉凱鑫;趙璐;鄭秀寧
• 申請（專利權(quán)）人: 山東天力藥業(yè)有限公司
• 主分類號: C12N11/14
• 分類號: C12N11/14;C12N9/10;C12P19/18;C12P19/12
• 代理公司: 山東華君知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 37300
• 代理人: 呂翠蓮

1.一種海藻糖的生產(chǎn)方法，其特征在于：包括硅膠改性、海藻糖合成酶固載、海藻糖合成；

所述硅膠改性，其方法為將B型硅膠放入硫酸水溶液中，加熱至微沸狀態(tài)后，恒溫回流1~2小時，然后濾出B型硅膠，用去離子水浸泡洗滌至洗出液的pH=6.8~7.0，自然晾干后得到清洗后的B型硅膠；將清洗后的B型硅膠、對二甲苯、γ-氨丙基三乙氧基硅烷、γ-巰丙基三乙氧基硅烷混合后，向其中滴加乙酸，將體系的pH調(diào)節(jié)到3.5~4.8，控溫140~160℃，150~300轉(zhuǎn)/分速率下，攪拌回流1.5~4小時后，濾出的硅膠用乙醇浸泡洗滌3~5次后，在50~80℃下干燥1~2.5小時，得到改性硅膠；

所述B型硅膠與硫酸水溶液的質(zhì)量比為1:2~4；

所述硫酸水溶液的質(zhì)量濃度為50~70wt%；

所述清洗后的B型硅膠、對二甲苯、γ-氨丙基三乙氧基硅烷、γ-巰丙基三乙氧基硅烷的質(zhì)量比為12~22:75~110:1~4:1~6；

所述海藻糖合成酶固載，其方法為將海藻糖合成酶酶液、1-乙基-（3-二甲基氨基丙基）碳二亞胺鹽酸鹽、2-氨基-2-脫氧-D-氨基葡萄糖鹽酸鹽、改性硅膠加到搖床振蕩器中，控制溫度10~35℃，旋轉(zhuǎn)速度100~200轉(zhuǎn)/分，振蕩5~9小時后，濾出硅膠固體，用去離子水洗滌3~5次后，得到固定化海藻糖合成酶；

所述海藻糖合成酶酶液、1-乙基-（3-二甲基氨基丙基）碳二亞胺鹽酸鹽、2-氨基-2-脫氧-D-氨基葡萄糖鹽酸鹽、改性硅膠的質(zhì)量比為10~20:0.1~0.3:0.05~0.15:1~5；

所述海藻糖合成，其方法為將固定化海藻糖合成酶放入麥芽糖溶液中，控溫45~65℃，控制攪拌速度100~260轉(zhuǎn)/分，反應(yīng)30~50小時后，過濾分離，濾液為海藻糖粗品，濾出物為固定化海藻糖合成酶；

所述B型硅膠，其形狀為近似球形，粒徑為0.5~2mm，平均孔徑為4~8nm，比表面積為580~600m²/g。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種海藻糖的生產(chǎn)方法，其特征在于：

所述海藻糖合成酶酶液，酶活性24.5~31.3U/mL。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種海藻糖的生產(chǎn)方法，其特征在于：

所述麥芽糖溶液，麥芽糖的質(zhì)量濃度為10~15wt%；

所述固定化海藻糖合成酶與麥芽糖溶液的質(zhì)量比為4~10:100。