[發明專利]一種腸炎沙門氏菌活疫苗

在審

• 申請號: 202210360337.8
• 申請日: 2022-04-06
• 公開（公告）號: CN114854654A
• 公開（公告）日: 2022-08-05
• 發明（設計）人: 李振;楚電峰;于可超;孫化露;孫鵬;侯玉超;于曉璐;張友明;范根成;杜元釗
• 申請（專利權）人: 青島易邦生物工程有限公司
• 主分類號: C12N1/21
• 分類號: C12N1/21;C12N15/74;C12N15/54;A61K39/112;A61P31/04;A61P1/00;A61P29/00;C12R1/42
• 代理公司: 北京識然知識產權代理事務所(普通合伙) 11975
• 代理人: 曾慶國

本發明提供一種禽腸炎沙門氏菌活疫苗，包含有抗原和佐劑，其中抗原是活的腸炎沙門氏菌(Salmonella enterica)R073△aroA株，其保藏編號為CCTCC M 2022376。所述的腸炎沙門氏菌R073ΔaroA株是通過Red/ET同源重組系統把腸炎沙門氏菌R073株的aroA基因缺失制備的。本發明所提供的腸炎沙門氏菌疫苗可以通過傳統的方法進行使用，比如通過經濟易操作的噴霧和飲用水進行大規模的施用，也可以通過肌肉注射或其他的方式進行施用。

技術領域

本發明屬于獸醫生物制品技術領域，具體涉及一種腸炎沙門氏菌活疫苗。

背景技術

腸炎沙門氏菌(Salmonella enteritidis)屬于無宿主特異性并且有侵害性的病原菌之一，宿主包括人以及各種動物。腸炎沙門氏菌不僅能引起家禽發病和死亡，造成嚴重的經濟損失，而且被污染的家禽產品如禽蛋和禽肉能作為作為腸炎沙門氏菌的攜帶著嚴重危害人類健康。根據國內外報道，美國、歐盟以及日本等發達國家發生的食物中毒事件中50％～80％是由禽沙門氏菌引起的，其中主要病原為腸炎沙門氏菌(S G Mellroy,etal.1989)。由腸炎沙門氏菌引起人的急性胃腸炎(食物中毒)，在世界各國有增加的趨勢，已成為國際公共衛生的一個重要課題。

腸炎沙門氏菌病發病時間快、死亡率高，目前養殖業中主要使用抗生素治療細菌感染性疾病。但是在動物機體中長期使用低于治療劑量的抗生素能大大加速耐藥細菌的出現，如果耐藥菌一旦在養殖動物中大范圍傳播，將使養殖動物成為很大的耐藥基因儲藏庫。因此通過疫苗來預防，利用非抗生素方法防控沙門氏菌病將是未來發展的必然趨勢，其中接種疫苗是有效防控沙門氏菌病發生和流行、減少禽產品污染及保證食品安全的重要途徑。但是目前沙門氏菌病疫苗多為化學隨機突變活或者自然傳代弱毒活疫苗，遺傳背景不清晰，具有毒力返強的危險。

隨著分子生物學及DNA重組技術的快速發展，基因工程疫苗成為近年來的研究熱點，基因缺失苗的優點顯而易見，既能保障疫苗保護效果，又降低了毒力返強的可能性利。

發明內容

本發明的目的是提供一種禽腸炎沙門氏菌活疫苗，是在篩選獲得了一種新型的腸炎沙門氏菌的基礎上，通過刪除aroA基因制備的弱毒株，使用該弱毒株來制備疫苗；該弱毒株保持了流行毒株腸炎沙門氏菌所具備的天然的免疫原性，同時毒性明顯致弱，遺傳背景清晰，缺失株不會返強，從而彌補現有技術的不足。

本發明所提供的腸炎沙門氏菌活疫苗，包含有抗原和佐劑，其中抗原是活的腸炎沙門氏菌(Salmonella enterica)R073△aroA株，其保藏編號為CCTCC NO: M 2022376，保藏地址:中國武漢武漢大學，中國典型培養物保藏中心，保藏日期為：2022 年04月02日。

所述的腸炎沙門氏菌R073ΔaroA株是通過Red/ET同源重組系統把腸炎沙門氏菌R073株的aroA基因缺失制備的。

所述的疫苗佐劑為水性疫苗佐劑。

本發明所提供的疫苗還用于制備用于防治家禽的制品；

所述的家禽包括雞、鴨、火雞、鵝、矮腳雞、鵪鶉、野雞、鴿子等，優選的是商業上重要的家禽例如雞、鴨、鵝、火雞，更優選的是雞和火雞，特別優選的是雞。

本發明所提供的腸炎沙門氏菌疫苗可以通過傳統的方法進行使用，比如通過經濟易操作的噴霧和飲用水進行大規模的施用，也可以通過肌肉注射或其他的方式進行施用。

附圖說明

圖1：aroA基因在腸炎沙門氏菌R073染色體中的位置圖。

圖2：腸炎沙門氏菌R073 aroA基因敲除路線圖。

圖3：PCR鑒定腸炎沙門氏菌R073 aroA基因敲除株圖。

圖4：腸炎沙門氏菌R073與R073△aroA生長曲線圖。