[發明專利]一種控制白樺裂葉性狀的基因及其應用有效
| 申請號： | 202210359488.1 | 申請日： | 2022-04-06 |
| 公開（公告）號： | CN114672495B | 公開（公告）日： | 2022-08-26 |
| 發明（設計）人： | 劉桂豐;方功桂;張連飛;唐杰;于凌峰;張慶祝;鄭志民;李慧玉;姜靜 | 申請（專利權）人： | 東北林業大學 |
| 主分類號： | C12N15/29 | 分類號： | C12N15/29;C12N15/84;C12N15/113;C12N15/55;C07K14/415;A01H5/12;A01H6/00 |
| 代理公司： | 北京東方盛凡知識產權代理事務所(普通合伙) 11562 | 代理人： | 賈耀淇 |
| 地址： | 150040 黑龍*** | 國省代碼： | 黑龍江;23 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 控制 白樺 性狀 基因 及其 應用 | ||
1.一種控制白樺裂葉性狀的基因，其特征在于，所述基因的cDNA核苷酸序列如SEQ IDNO:3所示。
2.一種如權利要求1所述的控制白樺裂葉性狀的基因編碼的蛋白，其特征在于，所述蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示。
3.一種包含權利要求1所述的控制白樺裂葉性狀的基因的表達載體。
4.一種構建權利要求3所述的表達載體的方法，其特征在于，包括以下步驟：
（1）提取白樺葉片總RNA，反轉錄為cDNA，以獲得的cDNA為模板，PCR擴增得到所述基因的目的產物；
（2）將所述目的產物與pCAMBIA1300-GFP載體連接，得到所述表達載體。
5.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，所述PCR擴增的引物對序列如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示。
6.一種包含權利要求3所述的表達載體的生物材料，其特征在于，所述生物材料為重組微生物。
7.一種根據權利要求1所述的基因構建基因編輯載體的方法，其特征在于，包括以下步驟：
（1）根據權利要求1所述的基因的外顯子區分別設計如SEQ ID NO:11-13所示的3個特異性sgRNA序列；
（2）通過PCR擴增分別獲得3個gRNA表達盒；
（3）將步驟（2）獲得的3個gRNA表達盒與pYLCRISPR/Cas9-DH載體依次順序連接，獲得質粒載體PYLCRISPR/Cas9-MH-AS2，即為所述基因編輯載體。
8.一種根據權利要求7所述的方法構建得到的基因編輯載體。
9.一種如權利要求1所述的基因、權利要求2所述的蛋白、權利要求3所述的表達載體或權利要求8所述的基因編輯載體在構建裂葉白樺中的應用。
10.一種裂葉白樺的構建方法，其特征在于，將權利要求8所述的基因編輯載體轉入農桿菌再侵染白樺種子，進行培育后，獲得所述裂葉白樺。
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