[發(fā)明專利]一種肉毒中毒小鼠呼氣分析模型

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202210359426.0
• 申請日: 2022-04-07
• 公開（公告）號: CN115032314A
• 公開（公告）日: 2022-09-09
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 高姍;王菁;胡宸藝;金涵;白雪欣;李巖偉;康琳;李佳欣;王景林;辛文文
• 申請（專利權(quán)）人: 中國人民解放軍軍事科學(xué)院軍事醫(yī)學(xué)研究院
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/88;G01N30/86
• 代理公司: 北京紀(jì)凱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 王灝增

本發(fā)明公開了一種肉毒中毒小鼠呼氣分析模型，在小鼠呼氣成分中發(fā)現(xiàn)了7種與肉毒毒素密切相關(guān)的組分，分別為包括丙酮、乙醇、2?戊酮、正丁醇、苯乙烯、D?甘露醇和3?甲基?3丁烯?1?醇。本發(fā)明的有效果在于，提供一種肉毒毒素中毒小鼠呼氣分析模型的構(gòu)建方法和與肉毒毒素中毒相關(guān)的標(biāo)志物組合，為快速鑒定肉毒毒素中毒提供了依據(jù)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，具體的說，涉及一種肉毒中毒小鼠呼氣分析模型。

背景技術(shù)

肉毒毒素是由一類由厭氧肉毒梭菌(Clostridium botulinum)產(chǎn)生的烈性蛋白類神經(jīng)毒素，是迄今所發(fā)現(xiàn)的生物毒素(包括化學(xué)毒物)中毒性最強的物質(zhì)。目前所知的肉毒毒素在人體中的作用機制是，能夠在人體中通過阻斷突觸小泡中神經(jīng)遞質(zhì)乙酰膽堿的釋放，使神經(jīng)和肌肉失去興奮性和傳導(dǎo)性，引起肌肉松弛性麻痹，嚴(yán)重時麻痹可累及呼吸肌，最終因呼吸衰竭致人死亡。近些年，報道的肉毒中毒病例數(shù)逐年升高，每年可達(dá)200例以上，主要包括食源性和醫(yī)源性中毒。食源性中毒是傳統(tǒng)的自然中毒途徑，隨著醫(yī)療美容行業(yè)的發(fā)展，通過注射肉毒毒素進(jìn)行除皺美容的人士越來越多，但不規(guī)范的治療以及錯誤用量，導(dǎo)致醫(yī)源性中毒的病例日益增多，每年可多達(dá)上百例。

目前，臨床上對于肉毒中毒病人的診斷主要以臨床癥狀分析與實驗室診斷相結(jié)合為主。實驗室診斷分為小鼠生物實驗法、免疫學(xué)檢測方法、基于生物傳感器的檢測方法、細(xì)胞學(xué)檢測法、質(zhì)譜法等。迄今為止，小鼠生物試驗法是中毒檢出的金標(biāo)準(zhǔn)，而過去30年中，免疫學(xué)方法中的酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)是被最廣泛應(yīng)用的肉毒毒素血清型鑒定和檢測的方法。但由于中毒患者臨床表現(xiàn)與格林－巴利綜合征、重癥肌無力等其他神經(jīng)類疾病相似，加上實驗室檢測普遍耗時長、對實驗人員要求較高，對患者做出最終診斷耗時較長并且容易做出錯誤診斷而耽誤最佳治療時間導(dǎo)致患者死亡。所以我們希望得到一種更加迅速、靈敏度高、特異性強并能直接適用于臨床的診斷新方法。

在機體中，細(xì)胞在維持細(xì)胞膜完整性、進(jìn)行能量代謝的過程中會產(chǎn)生許多內(nèi)源性的揮發(fā)性有機化合物(VOC_S)，這些代謝物通過汗液、血液、尿液、糞便和呼出的氣體等在人體中不斷釋放出來，并可在特定情況下以氣態(tài)形式被捕獲和檢測到。其中具有特征性的成分可以被認(rèn)為是人體氧化應(yīng)激反應(yīng)后產(chǎn)生的典型標(biāo)志物。標(biāo)志物濃度與人體受到氧化性損傷的程度相關(guān)，通過檢測人體中的揮發(fā)性有機物的成分及含量，可以反應(yīng)人體新陳代謝的過程，也可以判斷機體的生理狀況和病理情況。近年來由于分析領(lǐng)域的飛速發(fā)展，對疾病標(biāo)志物的研究也越發(fā)增多，其中以研究呼出氣體中VOCs 在疾病診斷價值的研究最多。呼出氣檢測因為其高效性、無創(chuàng)性、能夠適用于遠(yuǎn)程醫(yī)療，而受到極大關(guān)注，成為一種疾病診斷的新方式。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明提供一種肉毒中毒小鼠呼氣分析模型，在小鼠呼氣成分中發(fā)現(xiàn)了7種與肉毒毒素密切相關(guān)的組分，分別為包括丙酮、乙醇、2-戊酮、正丁醇、苯乙烯、D-甘露醇和3-甲基-3丁烯-1-醇。。

本發(fā)明提供一種用于檢測或者輔助檢測肉毒毒素中毒的標(biāo)志物組合物，所述標(biāo)志物組合物包括丙酮、乙醇、2-戊酮、正丁醇、苯乙烯、D-甘露醇和3-甲基-3丁烯-1- 醇。

上述的標(biāo)志物組合物在制備肉毒毒素中毒檢測或者輔助檢測產(chǎn)品中的應(yīng)用也應(yīng)在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。

其中，檢測或者輔助檢測為通過質(zhì)譜分析方法檢測被試者呼氣中的權(quán)利要求1所述的標(biāo)志物組合物的含量。

其中，所述產(chǎn)品為檢測或者輔助檢測肉毒毒素中毒的試劑、裝置或者系統(tǒng)。

所述的標(biāo)志物組合物作為肉毒毒素中毒的標(biāo)志物的應(yīng)用也應(yīng)在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。