[發(fā)明專利]一種鱗癌的醫(yī)學(xué)檢測(cè)方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202210359131.3
• 申請(qǐng)日: 2022-04-07
• 公開（公告）號(hào): CN114574563A
• 公開（公告）日: 2022-06-03
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉永紅
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 東莞蘭衛(wèi)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室有限公司
• 主分類號(hào): C12Q1/686
• 分類號(hào): C12Q1/686;C12Q1/6886
• 代理公司: 東莞市奧豐知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 44424
• 代理人: 田小紅

本發(fā)明屬于鱗癌的檢測(cè)標(biāo)記技術(shù)領(lǐng)域，尤其為一種鱗癌的醫(yī)學(xué)檢測(cè)方法，包括以下步驟：(1)采集需要檢測(cè)部位的樣本，并對(duì)樣本進(jìn)行初步處理；(2)對(duì)初步處理的樣本進(jìn)行DNA提取；(3)利用PCR擴(kuò)增物對(duì)提取的DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增；(4)對(duì)DNA的PCR擴(kuò)增物進(jìn)行瓊脂糖電泳；(5)讀取電泳結(jié)果，通過結(jié)果來判斷檢測(cè)結(jié)果。本發(fā)明通過對(duì)樣本的DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增引物，過程快速、結(jié)果準(zhǔn)確，經(jīng)PCR擴(kuò)增后行2％瓊脂糖電泳，根據(jù)PCR產(chǎn)物帶型即可判定結(jié)果，該方法的檢測(cè)速度塊，效率高，操作起來簡(jiǎn)單方便，可以快速的完成檢測(cè)，并且檢測(cè)的結(jié)果精確，費(fèi)用低，方便推廣使用。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及鱗癌的檢測(cè)標(biāo)記技術(shù)領(lǐng)域，具體為一種鱗癌的醫(yī)學(xué)檢測(cè)方法。

背景技術(shù)

鱗癌、原位癌及微小浸潤癌可無明顯肉眼病灶，宮頸光滑或僅為柱狀上皮異位。隨病情發(fā)展可出現(xiàn)不同體征。外生型宮頸癌可見息肉狀、菜花狀贅生物，常伴感染，腫瘤質(zhì)脆易出血；內(nèi)生型宮頸癌表現(xiàn)為宮頸肥大、質(zhì)硬、宮頸管膨大；晚期癌組織壞死脫落，形成潰瘍或空洞伴惡臭。陰道壁受累時(shí)，可見贅生物生長(zhǎng)于陰道壁或陰道壁變硬；宮旁組織受累時(shí)，雙合診、三合診檢查可捫及宮頸旁組織增厚、結(jié)節(jié)狀、質(zhì)硬或形成冰凍狀盆腔。據(jù)相關(guān)組織公布全世界每年大約有20萬名婦女死于這種疾病。

因此改善衛(wèi)生狀況，及時(shí)就診，早發(fā)現(xiàn)、早治療極為重要，在日常的檢查中需要對(duì)疑似病變部位處進(jìn)行取樣檢測(cè)，通過檢測(cè)的結(jié)果來判斷是否病變。但是，在目前的檢測(cè)過程中通常采用色譜法等等方法進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)操作繁瑣復(fù)雜，且費(fèi)用較高。

發(fā)明內(nèi)容

(一)解決的技術(shù)問題

針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供了一種鱗癌的醫(yī)學(xué)檢測(cè)方法，解決了上述背景技術(shù)中所提出的問題。

(二)技術(shù)方案

本發(fā)明為了實(shí)現(xiàn)上述目的具體采用以下技術(shù)方案：

一種鱗癌的醫(yī)學(xué)檢測(cè)方法，包括以下步驟：

(1)采集需要檢測(cè)部位的樣本，并對(duì)樣本進(jìn)行初步處理；

(2)對(duì)初步處理的樣本進(jìn)行DNA提取；

(3)利用PCR擴(kuò)增物對(duì)提取的DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增；

(4)對(duì)DNA的PCR擴(kuò)增物進(jìn)行瓊脂糖電泳；

(5)讀取電泳結(jié)果，通過結(jié)果來判斷檢測(cè)結(jié)果。

進(jìn)一步地，所述上述步驟1中所取樣的樣本不立即進(jìn)行DNA提取，則儲(chǔ)存在-70℃或液氮中，最好采用剛剛?cè)拥臉颖具M(jìn)行提取。

進(jìn)一步地，所述上述步驟2中DNA提取采用加熱快速制備法，加熱溫度為： 96℃-100℃，加熱五分鐘，然后離心處理，離心后取出上層的清液備用即可。

進(jìn)一步地，所述步驟3中DNA的PCR擴(kuò)增，首先，對(duì)其DNA提取物進(jìn)行高溫變性使之解鏈，高溫變性的溫度為：95℃；接著，對(duì)上述解鏈的DNA進(jìn)行降溫復(fù)性，使目的基因與引物雜交，降溫復(fù)性的溫度為：40℃-60℃；最后，在70℃ -75℃的溫度下，DNA聚合酶進(jìn)行酶促聚合反應(yīng)，使目的基因DNA序列在3’位置上逐漸延伸，新合成的引物延伸鏈又可以作為下一步反應(yīng)的模板，如此反復(fù)循環(huán)進(jìn)行，按照2^n的指數(shù)擴(kuò)增，短時(shí)間內(nèi)可獲得大量的DNA目的基因。

進(jìn)一步地，所述步驟4中PCR擴(kuò)增物的瓊脂糖電泳，PCR產(chǎn)物的2％瓊脂糖電泳：200V，電泳15min，得到電泳結(jié)果。

進(jìn)一步地，所述步驟5中的電泳結(jié)果：若同時(shí)出現(xiàn)268bp和360bp的條帶，則鑒定為rs1136697-G陽性樣本；若僅出現(xiàn)360bp的條帶，則鑒定為 rs1136697-G陰性樣本。

(三)有益效果

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明提供了一種鱗癌的醫(yī)學(xué)檢測(cè)方法，具備以下有益效果：