[發明專利]細胞激活能量蛋白及其制備方法

在審

• 申請號: 202210358066.2
• 申請日: 2022-04-07
• 公開（公告）號: CN114671955A
• 公開（公告）日: 2022-06-28
• 發明（設計）人: 張露引
• 申請（專利權）人: 上海艾苛密進出口有限公司
• 主分類號: C07K17/10
• 分類號: C07K17/10;C07K17/02;C07K14/47;C07K14/46;C07K14/78
• 代理公司: 上海洞鑒知識產權代理事務所(普通合伙) 31346
• 代理人: 劉少偉

本發明公開了一種細胞激活能量蛋白的制備方法，本發明使用酪蛋白多肽和鰹魚彈性蛋白肽結合，其中，酪蛋白多肽能夠針對人體免疫細胞完成激活、修復、再生及提升活性，從而激發免疫系統的主動性，達到恢復及鞏固自身免疫系統的作用；鰹魚彈性蛋白肽中含有鎖鏈素和異鎖鏈素，能夠與膠原蛋白肽發揮協同作用，激活人體真皮產生成纖維細胞，減緩彈性蛋白的流失，從而改善肌膚的彈性和柔軟度，減少肌膚皺紋。本發明以茶氨酸乙酯及色氨酸甲酯鹽酸鹽為原料，與β?酵母葡聚糖形成復合物，并以所述復合物作為酪蛋白多肽及鰹魚彈性蛋白肽的肽載體，進而提升兩種多肽的綜合穩定性。

技術領域

本發明涉及多肽的制備技術領域，尤其涉及一種細胞激活能量蛋白及其制備方法。

背景技術

酪蛋白多肽是一種從牛乳酪蛋白中提煉酶解出來的小分子蛋白短肽，經消化系統吸收進入人體循環系統后，能夠針對人體免疫細胞完成激活、修復、再生及提升活性，從而激發免疫系統的主動性，達到恢復及鞏固自身免疫系統的作用。鰹魚彈性蛋白肽提取自深海鰹魚的心臟動脈球組織，鰹魚彈性蛋白肽中含有鎖鏈素和異鎖鏈素，能夠與膠原蛋白肽發揮協同作用，激活人體真皮產生成纖維細胞，減緩彈性蛋白的流失，從而改善肌膚的彈性和柔軟度，減少肌膚皺紋。

酪蛋白多肽及鰹魚彈性蛋白肽具有上述優點及功效，已作為有效成分應用于各類保健品的生產制備中。發明人發現，現有的應用中，酪蛋白多肽及鰹魚彈性蛋白肽往往直接添加至口服保健品。酪蛋白多肽及鰹魚彈性蛋白肽進入消化體統后，大部分被各類消化酶分解為氨基酸后吸收，難以發揮原有的生物活性功效。同時，多肽成分的穩定性也直接影響了有效成分的實際效果，多肽的不穩定性是物理及化學兩方面雙重影響產生的結果，多肽的非酶催化的脫酰胺反應與環境條件及多肽自身的結構有關，溫度的升高及pH的變化都會誘導多肽脫酰胺反應的進行，造成殘基的水解；另外，多肽形成的溶液容易發生氧化及水解，不利于產品的保存，并且由氧化或水解引發的多肽變性過程形成的中間體在溶液中的溶解度減小，容易析出并形成聚集體，產生難溶于水的沉淀，大大阻礙了多肽的吸收，對產品造成不利的影響。

專利CN 107858390 A提供了一種基于胃腸消化的玉米大分子多肽制備的方法，采用超聲預處理玉米醇溶蛋白，顯著提高酶解產物的均一性；專利CN 108576502 A公開了一種利用鳀魚皮中活性多肽制備的復配物的方法，選用以紅棗為主原料制備復配物并通過添加中草藥成分豐富復配物功效再配合蜂蜜、蘋果汁、鳀魚活性多肽等成分進一步豐富復配物的口感，同時避免使用白糖，制備所得的復配物具有潤腸通便、降火解毒、消食除脹、健脾益胃、明目的功效，同時通過添加鳀魚活性多肽使復配物具有很好的抗氧化性能。上述專利都是將多肽直接作為原料，實際應用中可能會出現氧化、水解導致的功能下降等技術問題，并且不利于保存。

發明內容

有鑒于現有技術的上述缺陷，本發明所解決的技術問題是：(1)提供一種細胞激活能量蛋白的制備方法，提升細胞激活能量蛋白的穩定性、抗氧化性；(2)加強肽載體對蛋白肽的結合能力，提升細胞激活能量蛋白的乳化性能。

為了提升酪蛋白多肽及鰹魚彈性蛋白肽的穩定性，發明人以茶氨酸乙酯及色氨酸甲酯鹽酸鹽為原料，與β-酵母葡聚糖形成復合物，并以所述復合物作為酪蛋白多肽及鰹魚彈性蛋白肽的肽載體，進而提升兩種多肽的綜合穩定性。茶氨酸的乙酰化過程中，發明人選擇了較低的反應溫度以避免在70℃上出現的消旋現象。發明人在肽載體得制備中使用1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺來促進原料件的結合，1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺通過激活羧基生成不穩定的中間體O-酰基異脲，然后中間體進一步與胺結合形成穩定的酰胺鍵。為了達到最佳的活化效果，發明人將反應的pH嚴格控制在5～6，在維持反應正常進行的同時避免胺基出現質子化導致的對中間體的親和性降低。

一種細胞激活能量蛋白的制備方法，包括下述步驟：以茶氨酸乙酯及色氨酸甲酯鹽酸鹽合成形成的復合物或茶氨酸乙酯及色氨酸甲酯鹽酸鹽與β-酵母葡聚糖合成形成的復合物為肽載體，使用該肽載體對酪蛋白多肽及鰹魚彈性蛋白肽進行包封。

優選的，一種細胞激活能量蛋白的制備方法，包括下述步驟：