[發(fā)明專利]一種殺螟硫磷納米抗體-膠體金標(biāo)記物的制備方法和應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202210357015.8
• 申請(qǐng)日: 2022-04-06
• 公開（公告）號(hào): CN114675028A
• 公開（公告）日: 2022-06-28
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 徐振林;王弘;郭銘威;張譯豐;孫遠(yuǎn)明
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 華南農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N33/58
• 分類號(hào): G01N33/58;G01N33/558;G01N33/543;G01N33/532;G01N33/53;G01N33/52
• 代理公司: 廣州粵高專利商標(biāo)代理有限公司 44102
• 代理人: 趙崇楊

1.一種殺螟硫磷納米抗體-膠體金標(biāo)記物的制備方法，其特征在于，向膠體金溶液中加入殺螟硫磷納米抗體，混勻靜置，進(jìn)行封閉，再靜置離心，棄上清液，沉淀用膠體金復(fù)溶液重懸，即得殺螟硫磷納米抗體-膠體金標(biāo)記物；所述膠體金溶液由1％氯金酸和1％檸檬酸三鈉體積比為1:2配制得到；所述殺螟硫磷納米抗體的添加量5～10μg/mL；所述封閉采用10％的牛血清蛋白25～35μL進(jìn)行封閉反應(yīng)25～40min；所述膠體金復(fù)溶液的配方為：0.02～0.5MBB、BSA:0.1％～2％、蔗糖:1％～15％、曲拉通-100:0.1％～2％、PVP:0.1％～2％。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述制備方法，其特征在于，所述膠體金溶液pH為6.5～7.5。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述制備方法，其特征在于，所述膠體金復(fù)溶液的配方為：0.2M BB、BSA:0.5％～2％、蔗糖:2％～10％、曲拉通-100:0.5％～2％、PVP:0.2％～1％。

4.權(quán)利要求1～3任一所述方法制備得到的殺螟硫磷納米抗體-膠體金標(biāo)記物。

5.權(quán)利要求4所述殺螟硫磷納米抗體-膠體金標(biāo)記物在檢測(cè)殺螟硫磷農(nóng)藥中的應(yīng)用。

6.權(quán)利要求4所述殺螟硫磷納米抗體-膠體金標(biāo)記物在制備檢測(cè)殺螟硫磷的納米抗體-膠體金試紙條中的應(yīng)用。

7.一種檢測(cè)殺螟硫磷農(nóng)藥的納米抗體-膠體金試紙條，其特征在于，含有權(quán)利要求4所述殺螟硫磷納米抗體-膠體金標(biāo)記物。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述試紙條，其特征在于，試紙條由以下步驟制備得到：

S1.采用權(quán)利要求1所述方法制備殺螟硫磷納米抗體-膠體金標(biāo)記物；

S2.將結(jié)合釋放墊用膠體金復(fù)溶液浸泡后烘干，并采用步驟S1制備得到的殺螟硫磷納米抗體-膠體金標(biāo)記物噴涂在處理過的結(jié)合釋放墊上，進(jìn)行烘干后密封干燥保存；

S3.將殺螟硫磷農(nóng)藥半抗原-乳鐵球蛋白偶聯(lián)物包被到反應(yīng)膜上構(gòu)成檢測(cè)線，將兔抗駝抗體包被在反應(yīng)膜上構(gòu)成質(zhì)控線；

S4.將樣品吸收墊置于緩沖液中浸泡，烘干后備用；

S5.將樣品吸收墊、結(jié)合釋放墊、反應(yīng)膜、吸水墊在底板上順次進(jìn)行組裝，即得檢測(cè)殺螟硫磷農(nóng)藥的納米抗體膠體金試紙條。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述試紙條，其特征在于，步驟S2中采用的殺螟硫磷農(nóng)藥半抗原-乳鐵球蛋白偶聯(lián)物濃度為0.1～0.5mg/mL，包被量為0.5～1.0μL/cm；兔抗駝抗體濃度為0.5～2mg/mL，包被量為0.5～1.0μL/cm。

10.權(quán)利要求7所述檢測(cè)殺螟硫磷農(nóng)藥的納米抗體-膠體金試紙條在檢測(cè)殺螟硫磷農(nóng)藥殘留中的應(yīng)用。