[發明專利]一種多酶遞送納米顆粒、其制備方法和應用

在審

• 申請號: 202210351425.1
• 申請日: 2022-04-02
• 公開（公告）號: CN114832096A
• 公開（公告）日: 2022-08-02
• 發明（設計）人: 嚴然
• 申請（專利權）人: 嚴然
• 主分類號: A61K38/44
• 分類號: A61K38/44;A61K38/47;A61K9/51;A61K47/59;A61P19/06;A61P25/32
• 代理公司: 南京樂羽知行專利代理事務所(普通合伙) 32326
• 代理人: 朱磊

1.一種多酶遞送納米顆粒，由高分子聚合物，多種酶，引發劑，單體和交聯劑組成。

2.根據權利要求1所述多酶遞送納米顆粒，其特征在于：所述高分子聚合物為具有生物相容性的中性聚合物，包括聚乙二醇， 聚2-甲基丙烯酰氧乙基磷酸膽堿或聚乙烯吡咯烷酮。

3.根據權利要求1所述多酶遞送納米顆粒，其特征在于：所述多種酶包括尿酸氧化酶，過氧化氫酶,葡萄糖氧化酶，β-半乳糖苷酶,交替氧化酶，乙醛脫氫酶，超氧化物歧化酶。

4.根據權利要求1所述多酶遞送納米顆粒，其特征在于：所述引發劑為α-溴異丁酰基。

5.根據權利要求1所述多酶遞送納米顆粒，其特征在于：所述單體為帶有不飽和C-C鍵的分子,包括丙烯酸，2-甲基丙烯酰氧乙基磷酸膽堿， 丙烯酰胺， N-(3-氨基丙基) 甲基丙烯酰胺， 丙烯酸N,N-二乙基氨基乙酯。

6.根據權利要求1所述多酶遞送納米顆粒，其特征在于：所述交聯劑為N，N，甲叉雙丙烯酰胺。

7.根據權利要求1所述多酶遞送納米顆粒，其特征在于：所述納米顆粒為球形結構，粒徑為10-150 nm，表面電荷-2-6mV。

8.一種多酶遞送納米顆粒的制備方法，包括以下步驟：

第一步、將α-溴異丁酰基和高分子聚合物接枝到聚烯丙胺形成帶正電荷的接枝聚合物；

第二步、將多種酶與帶正電荷的接枝聚合物共組裝形成酶-聚合物凝聚層復合物；

第三步、在室溫下，由引發劑與單體和交聯劑進行聚合將酶-聚合物凝聚層復合物包裹在薄的聚合物網絡殼內，形成多酶納米顆粒。

9.根據權利要求8所述多酶遞送納米顆粒的制備方法，其特征在于：將過氧化氫酶CAT和尿酸氧化酶UOX溶液以 1:1 的摩爾比混合，以總酶與聚合物的質量比為 5:1添加至聚合物溶液HEPES 7.4 緩沖液中的 1 mg/mL,混合物在室溫下孵育15 min，隨后使用DEAE 柱純化;在氮氣下以 1:1 的摩爾比混合三-( N , N-二甲氨基乙基)胺Me6TREN 和溴化亞銅CuBr 來制備用于原子轉移自由基聚合的銅催化劑,以固定摩爾比混合 P(UOX-CAT) 溶液、HEPES 緩沖液中 10% w/v，pH 7.4的共聚單體MPC溶液和交聯劑DMSO 中 10% w/v的 BIS溶液，比例為 1:40:30000:3000,在用氮氣鼓泡前體溶液 20 分鐘后，在氮氣下,將銅催化劑添加到溶液中,銅催化劑與 P(UOX-CAT) 中BIB部分的摩爾比保持在 1:10,在室溫下攪拌后10-20 分鐘后，將溶液暴露在空氣中終止聚合,將反應混合物在1 mM EDTA 溶液中透析 24 小時，用去離子水再透析 24 小時除去催化劑和未反應的單體和交聯劑，得到純化的納米顆粒;上述方法中酶的選擇或為將葡萄糖氧化酶和β-半乳糖苷酶以1:1的摩爾比混合，總酶和聚合物之間的質量比為 2.5:1，按相同方法純化；或為將交替氧化酶、乙醛脫氫酶和 和過氧化氫酶以1:2.5:1摩爾比混合，總酶和聚合物之間的質量比為 5:1,按相同方法純化。

10.根據權利要求1所述多酶遞送納米顆粒在制備多種蛋白同時體內遞送藥物中的應用。