[發(fā)明專利]一種基于喹啉酮母體的同位素編碼標(biāo)記試劑及其合成方法與應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202210349128.3
• 申請(qǐng)日: 2022-04-01
• 公開（公告）號(hào): CN114591237B
• 公開（公告）日: 2023-08-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 孫志偉;張嘉偉;宋翠華;尤進(jìn)茂
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 曲阜師范大學(xué)
• 主分類號(hào): C07D215/48
• 分類號(hào): C07D215/48
• 代理公司: 山東知圣律師事務(wù)所 37262
• 代理人: 陳輝

本發(fā)明涉及同位素編碼衍生技術(shù)領(lǐng)域，具體公開一種基于喹啉酮母體的同位素編碼標(biāo)記試劑及其合成方法與應(yīng)用，該標(biāo)記試劑的化學(xué)結(jié)構(gòu)式如式1所示：所述式1中：X＝H或D。采用本發(fā)明的同位素編碼標(biāo)記試劑對(duì)待測(cè)樣本進(jìn)行標(biāo)記時(shí)，無需對(duì)樣本進(jìn)行復(fù)雜的前處理，通過重型標(biāo)記試劑使目標(biāo)物物分子量更大地增大，避免了質(zhì)譜檢測(cè)低分子量區(qū)域的信號(hào)干擾。相比較傳統(tǒng)的內(nèi)標(biāo)，本發(fā)明的輕型、重型標(biāo)記試劑不僅原料更易獲得、價(jià)格相對(duì)低廉，合成路線簡(jiǎn)單、反應(yīng)條件溫和，顯著降低了實(shí)驗(yàn)成本和難度。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及同位素編碼衍生技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種基于喹啉酮母體的同位素編碼標(biāo)記試劑及其合成方法與應(yīng)用。

背景技術(shù)

本發(fā)明背景技術(shù)中公開的信息僅僅旨在增加對(duì)本發(fā)明的總體背景的理解，而不必然被視為承認(rèn)或以任何形式暗示該信息構(gòu)成已經(jīng)成為本領(lǐng)域一般技術(shù)人員所公知的現(xiàn)有技術(shù)。

高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)(簡(jiǎn)稱為HPLC-MS/MS)由于其高靈敏度、高選擇性而被廣泛地應(yīng)用于食品分析、生命分析與環(huán)境監(jiān)測(cè)中等多種研究領(lǐng)域中。采用HPLC-MS/MS的選擇反監(jiān)測(cè)(select?reaction?monitoring，SRM)或多級(jí)反應(yīng)監(jiān)測(cè)(multiple?reactionmonitoring，MRM)可以同時(shí)監(jiān)測(cè)多個(gè)化合物，并且可以選擇性的監(jiān)測(cè)目標(biāo)分析物，具有較強(qiáng)的特異性。尤其適合于復(fù)雜的、基質(zhì)背景高的樣品，能夠有效地降低噪音影響，具有靈敏度高且檢測(cè)速度快等特點(diǎn)。但是基質(zhì)效應(yīng)問題卻由于樣品基質(zhì)或者共洗脫的影響而難以解決，使其分析效能飽受影響而大打折扣。

近年來同位素編碼衍生技術(shù)受到了廣泛關(guān)注，該技術(shù)采用同位素標(biāo)記試劑在分析物上引入輕/重同位素編碼，從而得到具有相同官能團(tuán)的一類同位素衍生物。目前，該技術(shù)主要采用通過對(duì)目標(biāo)分析物中的可反應(yīng)基團(tuán)引入同位素內(nèi)標(biāo)進(jìn)行修飾(即同位素內(nèi)標(biāo)法)，通過高效液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用實(shí)現(xiàn)定性以及定量。然而，目前的這類同位素編碼衍生技術(shù)依然存在以下方面的不足：一方面，對(duì)應(yīng)的同位素內(nèi)標(biāo)往往昂貴且難以獲得；另一方面，標(biāo)記效率具有有限性且會(huì)對(duì)后續(xù)的分離檢測(cè)過程引入定量誤差。

發(fā)明內(nèi)容

針對(duì)上述的問題，本發(fā)明提供一種基于喹啉酮母體的同位素編碼標(biāo)記試劑及其合成方法與應(yīng)用，相對(duì)于上述的現(xiàn)有的同位素編碼衍生技術(shù)，本發(fā)明提供的同位素編碼標(biāo)記試劑能夠顯著的提高分析的準(zhǔn)確性以及分析效率，而且成本更低。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明公開如下的技術(shù)方案：

在本發(fā)明的第一方面，提供一種基于喹啉酮母體的同位素編碼輕型標(biāo)記試劑，其命名為[d₀]1-甲基-4-氧-1,4-二氫-代喹啉-2-羧酸，簡(jiǎn)寫為[d₀]–MQOA，其化學(xué)結(jié)構(gòu)式如式1所示。

在本發(fā)明的第二方面，提供一種基于喹啉酮母體的同位素編碼重型標(biāo)記試劑，其命名為[d₃]1-甲基-4-氧-1,4-二氫-代喹啉-2-羧酸，簡(jiǎn)寫為[d₃]–MQOA，其化學(xué)結(jié)構(gòu)式如式2所示。

其中：所述D即H元素的同位素氘。

在本發(fā)明的第三方面，提供所述基于喹啉酮母體的同位素編碼輕型標(biāo)記試劑的合成方法，包括如下步驟：

(1)將甲基化試劑、4-氧-1,4-二氫-代喹啉-2-羧酸加入溶劑中反應(yīng)，即得輕型中間體。其中：所述4-氧-1,4-二氫-代喹啉-2-羧酸的化學(xué)結(jié)構(gòu)式如式3所示，所述輕型中間體的化學(xué)結(jié)構(gòu)式如式4所示。

(2)將所述輕型中間體在堿性條件下水解，完成后調(diào)節(jié)水解液的酸堿度使產(chǎn)物析出，即得所述輕型標(biāo)記試劑。

進(jìn)一步地，步驟(1)中，所述甲基化試劑為碘甲烷(CH₃I)，硫酸二甲酯(CH₃OSO₂OCH₃)等中的任意一種。