[發明專利]一株產聚谷氨酸的藍色解淀粉芽孢桿菌

在審

• 申請號: 202210340897.7
• 申請日: 2022-04-02
• 公開（公告）號: CN114958646A
• 公開（公告）日: 2022-08-30
• 發明（設計）人: 劉靜雯;劉浩;孫成武
• 申請（專利權）人: 安徽粵智徽源生物科技有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12P13/02;C12R1/07
• 代理公司: 合肥輝達知識產權代理事務所(普通合伙) 34165
• 代理人: 汪守勇

1.一株產聚谷氨酸的藍色解淀粉芽孢桿菌，菌株形態為藍色菌落，分類學命名為解淀粉芽孢桿菌，拉丁名為Bacillus amyloliquefaciens，自主編號為YZHY21.A02，已保藏于廣東省微生物菌種保藏中心，保藏號為GDMCC NO：61924，保藏日期為2021年9月9日，保藏單位地址為廣州市先烈中路100號大院59號樓5樓，廣東省科學院微生物研究所，郵政編碼510070。

2.如權利要求1所述的藍色解淀粉芽孢桿菌，其特征在于，該菌株采用如下方法分離：取2g廣東陽江地區豆豉放入裝有50mL無菌水的并帶有玻璃珠的300mL三角瓶中，震蕩1h，并在80℃水浴20min；取上述菌懸液0.1mL于10mL滅菌離心管中，進行梯度稀釋并涂布到營養瓊脂培養基上，35℃倒置恒溫培養，待長出單菌落后挑取藍綠色菌落再次稀釋涂布，恒溫培養，之后將單一菌落接種到營養瓊脂斜面35℃恒溫培養，培養完成后放4℃冰箱保存。

3.如權利要求2所述的藍色解淀粉芽孢桿菌，其特征在于，所采用的瓊脂培養基組成為：蛋白胨10g/L，酵母粉5g/L，氯化鈉10g/L，瓊脂18g/L，pH值7.4。

4.如權利要求1所述藍色解淀粉芽孢桿菌在發酵生產聚谷氨酸中的應用，其特征在于，發酵培養基采用谷氨酸發酵培養基或者黃豆發酵培養基。

5.如權利要求4所述的應用，其特征在于，采用谷氨酸發酵培養基發酵生產聚谷氨酸的步驟如下：取斜面菌種接種于液體種子培養基，35℃，150r/min培養12～24h，再接種至搖瓶發酵培養基，35～40℃，150r/min搖瓶發酵48～72h；取發酵液加水稀釋2～3倍，8000r/min離心20～25min去除菌體及其它不溶物，取上清液加入2～3倍95％乙醇沉淀12～24h，再離心收集沉淀物，然后加去離子水將沉淀物溶解，冷凍干燥，可得到聚谷氨酸粗品。

6.如權利要求5所述的應用，其特征在于，液體種子培養基組成為：葡萄糖10g/L，蛋白胨10g/L，酵母粉5g/L，氯化鈉10g/L，pH值7.4；發酵培養基組成為：葡萄糖40g/L，谷氨酸鈉50g/L，酵母粉3g/L，氯化銨2g/L，磷酸氫二鉀3g/L，硫酸鎂0.3g/L，氯化鈣0.4g/L，pH值7.2～7.5。

7.如權利要求4所述的應用，其特征在于，采用黃豆發酵培養基發酵生產聚谷氨酸的步驟如下：將黃豆洗凈并在水中浸泡12～18h，取50g放在300mL三角瓶中121℃滅菌25min；在斜面試管中倒入適量無菌水，將菌落刮至無菌水中，然后倒入裝有黃豆的三角瓶中晃勻，放置在35～40℃培養箱中培養48～72h；加入黃豆量的6～10倍去離子水沖洗黃豆，8000r/min離心20～25min去除菌體及其它不溶物，取上清液加入2～3倍95％乙醇沉淀12～24h，再離心收集沉淀物，然后加去離子水將沉淀物溶解，冷凍干燥，可得到聚谷氨酸粗品。