[發明專利]一種細胞膜靶向納米探針及其制備和在光響應調控神經元鈣離子流動上的應用

在審

• 申請號: 202210315339.5
• 申請日: 2022-03-28
• 公開（公告）號: CN114767850A
• 公開（公告）日: 2022-07-22
• 發明（設計）人: 陳俊孜;吳迪
• 申請（專利權）人: 浙江中醫藥大學
• 主分類號: A61K41/00
• 分類號: A61K41/00;A61K33/242;A61K47/60;A61K47/68;A61P25/00;B22F1/054;B22F9/24;B82Y5/00;B82Y40/00
• 代理公司: 杭州君度專利代理事務所(特殊普通合伙) 33240
• 代理人: 朱亞冠

1.一種神經元細胞膜靶向納米探針的制備方法，其特征在于包括以下步驟：

步驟(1)：長度為30-70nm、直徑為5-10nm、長徑比不小于5的金納米棒制備；

步驟(2)：巰基聚乙二醇-抗辣椒素受體抗體HS-PEG-Anti-TRPV-1二聚體的制備；

在弱堿性環境中，在巰基聚乙二醇琥珀酰胺酯HS-PEG-NHS溶液中加入Anti-TRPV-1，溫度25℃下反應2小時以上，透析袋除去未反應物，將剩余溶液凍干，得到HS-PEG-Anti-TRPV-1二聚體；

步驟(3)：HS-PEG-Anti-TRPV-1二聚體的修飾；

在水相環境體系中，將金納米棒和HS-PEG-Anti-TRPV-1二聚體混勻，利用具有高度親和性Au-S鍵，得到HS-PEG-Anti-TRPV-1二聚體修飾的金納米棒，即納米探針的粗產品；通過離心水洗后，可除去未反應物，得到提純后的納米探針。

2.如權利要求1所述的方法，其特征在于步驟(1)具體是將十六烷基苯磺酸鈉、氯酸金混合后加入硝酸銀攪拌一段時間，然后調節pH至1-2后再加入還原劑氫醌水溶液，制備得到金納米種子；將金納米種子置于溫度4-60℃水浴中反應15分鐘以上，快速加入硼氫化鈉溶液作為老化劑，促使金納米種子縱向生長形成金納米棒。

3.如權利要求3所述的方法，其特征在于步驟(1)具體是配制10mL濃度為0.01-0.2M十六烷基苯磺酸鈉溶液作為穩定劑，加入500μL濃度為1-20mM氯酸金溶液快速攪拌，然后再加入20μL濃度為0.1-2M的硝酸銀溶液攪拌，最后加入10-30μL濃度為1M的鹽酸調節pH后加入500μL濃度為0.1-1M的氫醌水溶液作為還原劑，制備得到金納米種子；將上述金納米種子在溫度4-60℃水浴中反應15分鐘以上，快速加入硼氫化鈉溶液作為老化劑，促使金納米種子縱向生長形成金納米棒。

4.如權利要求1所述的方法，其特征在于步驟(2)反應體系pH值在5-9。

5.如權利要求1所述的方法，其特征在于步驟(2)Anti-TRPV-1與HS-PEG-NHS的摩爾比為1:10-10:1。

6.如權利要求1所述的方法，其特征在于步驟(3)金納米棒和HS-PEG-Anti-TRPV-1二聚體的摩爾比為1:10-10:1。

7.一種神經元細胞膜靶向納米探針，采用權利要求1-6任一項所述的方法制備得到。

8.權利要求7所述的一種神經元細胞膜靶向納米探針在光響應調控神經元鈣離子流動上的應用。

9.權利要求7所述的一種神經元細胞膜靶向納米探針在用于干預或治療與鈣離子流動失衡相關的疾病試劑盒上的應用。

10.一種用于干預或治療與鈣離子流動失衡相關的疾病試劑盒，其特征在于包括權利要求7所述的一種神經元細胞膜靶向納米探針。