[發明專利]與紫蘇耐鹽相關蛋白PfWRKY33及其編碼基因與應用

有效

• 申請號: 202210315205.3
• 申請日: 2022-03-29
• 公開（公告）號: CN114989276B
• 公開（公告）日: 2023-07-14
• 發明（設計）人: 李輝;姜濤;溫春秀;劉靈娣
• 申請（專利權）人: 湖南文理學院;河北省農林科學院經濟作物研究所
• 主分類號: C07K14/415
• 分類號: C07K14/415;C12N15/29;C12N15/82;C12N1/21;A01H5/00;A01H6/50;C12R1/01
• 代理公司: 北京奧肯律師事務所 11881
• 代理人: 張奔

本發明公布了與紫蘇耐鹽相關蛋白PfWRKY33及其編碼基因與應用。本發明提供一種蛋白，是如下(a)或(b)：(a)有序列表中序列2所示的氨基酸序列提供的蛋白質；(b)將序列表中序列2所示的氨基酸序列經過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且與植物耐鹽有關的由序列2衍生的蛋白質。本發明的實驗證明，本發明提供的PfWRKY33蛋白及其編碼基因，將該基因導入丹參中，得到轉基因丹參，研究發現轉PfWRKY33基因的丹參耐鹽性提高，說明該蛋白及其編碼基因在提高植物耐鹽性方面具有重要的應用價值。本發明將在植物領域中具有廣闊的應用空間和市場前景。

技術領域

本發明涉及生物技術領域中與紫蘇耐鹽性相關蛋白PfWRKY33及其編碼基因與應用。

背景技術

隨著環境氣候的變化，土地的不合理利用，人類對環境的破壞等因素，全球土壤鹽漬化日益嚴重，鹽脅迫已成為抑制植物生長發育的限制因素，是影響農業可持續發展的一個重要因子。當植物處于鹽脅迫環境時，植物根系會吸收大量的Na⁺，在植物體內積累過量造成離子脅迫，從而降低植物的光合效率，損害植物的新陳代謝，抑制植物的生長發育。而植物在長期的生長進化過程中形成了一套自我保護機制，通過改變植物體內的生理生化環境，形成一種抗逆機制。鹽脅迫環境下，植物首先通過滲透調節途徑降低細胞水勢，使細胞內水分向有利于細胞生長方向運輸，確保植物生長。WRKY轉錄調控因子在植物逆境信號傳遞中起著重要的調控作用，能夠參與調控抗逆相關基因的表達，從而提高植物的抗逆性。WRKY轉錄調控因子在植物組織中表達具有特異性，并且受低溫、高溫、干旱和病原菌等非生物脅迫誘導表達。已有研究結果表明干旱條件下水稻OsWRKY80基因在葉中的表達量顯著增加；擬南芥中過量表達AtWRKY25或者AtWRKY33基因能夠顯著提高擬南芥的耐鹽性。

發明內容

本發明的一個目的是提供與紫蘇耐鹽相關蛋白PfWRKY33及其編碼基因與應用。

本發明提供的與紫蘇耐鹽相關的蛋白，名稱為PfWRKY33，來源于紫蘇(Perillafrutescens?L.)，如下(a)或(b)的蛋白質：

(a)由序列表中序列2所示的氨基酸序列組成的蛋白質；

(b)將序列表中序列2所示的氨基酸序列經過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且與植物耐鹽性有關的由序列2衍生的蛋白質。

所述序列2由605個氨基酸殘基組成。

所述編碼上述蛋白的DNA分子也屬于本發明的保護范圍。

所述DNA分子是如下(1)-(3)中任一種的DNA分子：

(1)編碼序列為序列表中序列1所示的DNA分子；

(2)在嚴格條件下與(1)限定的DNA序列雜交且編碼植物耐鹽性相關蛋白的DNA分子；

(3)與(1)限定的DNA序列至少具有70％、至少具有75％、至少80％、至少具有85％、至少具有90％、至少具有95％、至少具有96％、至少具有97％、至少具有98％或至少具有99％同源性且編碼植物耐鹽性相關蛋白的DNA分子。

所述序列1由1818堿基組成，其開放閱讀框(ORF)為自5′末端起第1位-第1818位堿基，編碼氨基酸序列是序列表中序列2所示的蛋白。

上述嚴格條件可為用6×SSC，0.5％SDS的溶液，在65℃下雜交，然后用2×SSC，0.1％SDS和1×SSC，0.1％SDS各洗膜一次。

含有所述與紫蘇耐鹽性相關蛋白的編碼基因的表達盒、重組表達載體、轉基因細胞系或重組菌也屬于本發明的保護范圍。

所述重組表達載體是在載體pCambia1300-GFP的多克隆位點間插入所述編碼基因得到的重組表達載體；