[發(fā)明專利]USP11在抑制細(xì)胞因子IL6降解中的應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202210308116.6
• 申請日: 2022-03-27
• 公開（公告）號: CN114736917B
• 公開（公告）日: 2023-08-01
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 祁小飛
• 申請（專利權(quán)）人: 蘇州大學(xué)
• 主分類號: C12N15/57
• 分類號: C12N15/57;C12N15/861;C12N15/867;C12N5/10;A61K38/48;A61K45/00;A61P35/00;A61P37/04
• 代理公司: 蘇州創(chuàng)元專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 32103
• 代理人: 孫周強(qiáng);陶海鋒

IL6是一種重要的細(xì)胞因子，在抗感染，腫瘤免疫，免疫細(xì)胞發(fā)育等過程中發(fā)揮著重要的作用，因此維持一定水平的IL6水平，使其免于過早被降解在上述過程中顯得非常重要。USP11是參與機(jī)體泛素化過程的基因，研究發(fā)現(xiàn)其在多種腫瘤中表達(dá)異常，未見其參與IL6降解的研究。本發(fā)明公開了USP11新的功能?保護(hù)IL6避免降解的作用，為抗感染和腫瘤的治療提供新的靶點(diǎn)與思路。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物技術(shù)，具體公開了USP11在抑制細(xì)胞因子IL6?降解中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

IL6是一種重要的細(xì)胞因子，在抗感染，腫瘤免疫，免疫細(xì)胞發(fā)育等過程中發(fā)揮著重要的作用，因此維持一定的IL6水平，使其免于過早被降解在上述過程中顯得非常重要。USP11是參與機(jī)體泛素化過程的基因，研究發(fā)現(xiàn)其在多種腫瘤中表達(dá)異常，未見其參與IL6降解的研究。

發(fā)明內(nèi)容

現(xiàn)有技術(shù)針對IL6降解的研究較少，本發(fā)明公開了USP11新的功能-保護(hù)IL6避免降解的作用，為抗感染和腫瘤的治療提供新的靶點(diǎn)與思路。

本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：

USP11在抑制細(xì)胞因子IL6?降解中的應(yīng)用。

USP11在制備抑制細(xì)胞因子IL6?降解藥物中的應(yīng)用。

過表達(dá)USP11的試劑在抑制細(xì)胞因子IL6?降解中的應(yīng)用，或者在制備抑制細(xì)胞因子IL6?降解藥物中的應(yīng)用。

本發(fā)明中，USP11以病毒載體或者質(zhì)粒的形式作為藥物，比如慢病毒、腺病毒等常規(guī)病毒載體。

本發(fā)明分別取USP11基因敲除C57小鼠為實(shí)驗(yàn)組，對照組為USP11野生型C57小鼠。皮下注射5mg/kg?LPS，特定時間點(diǎn)取小鼠血清，ELISA檢測IL-6含量，證實(shí)USP11能避免IL6過早降解，為抗感染和腫瘤治療提供更有效的治療策略及思路。

附圖說明

圖1為LPS（5mg/kg）處理后小鼠血清內(nèi)IL-6表達(dá)水平。

圖2為人重組腺病毒感染293細(xì)胞。

圖3為Ad-USP11和Ad-NC組細(xì)胞IL-6?mRNA表達(dá)水平差異。

圖4為Ad-USP11和Ad-NC細(xì)胞上清液內(nèi)IL-6表達(dá)差異。

圖5為慢病毒感染293細(xì)胞。

圖6為sh-USP11和sh-NC組細(xì)胞IL-6?mRNA表達(dá)水平差異。

具體實(shí)施方式

C57BL/6小鼠(H-2^b)為雌性小鼠，周齡為6-8周，體重為17-22?克，購買上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動物公司。C57BL/6?遺傳背景的?USP11^-/-小鼠、人293細(xì)胞源自蘇州大學(xué)醫(yī)學(xué)部放射醫(yī)學(xué)與防護(hù)學(xué)院。小鼠的飲用水、飼料和墊料均經(jīng)過滅菌處理。所有小鼠均飼養(yǎng)于SPF級別的隔離籠內(nèi)。所有動物實(shí)驗(yàn)均按照蘇州大學(xué)實(shí)驗(yàn)與動物倫理委員要求操作。

超凈臺消毒滅菌，快速復(fù)蘇293細(xì)胞。用10%血清DMEM培養(yǎng)基（青霉素+鏈霉素）于無菌培養(yǎng)皿內(nèi)培養(yǎng)。定期觀察。在超凈臺內(nèi)用無菌PBS將LPS粉末溶解，配制為1mg/kg的試劑。分裝置于-80℃冰箱內(nèi)待用。

ELSIA檢測細(xì)胞因子。

血清獲得方法。摘眼球取小鼠外周血至于于無熱源和內(nèi)毒素的試管內(nèi)，室溫下靜置2h，離心，1000g，30min。取上清液于-80℃待用。