[發明專利]一種防治青枯病的芽孢桿菌復合菌劑及其應用

有效

• 申請號: 202210302465.7
• 申請日: 2022-03-25
• 公開（公告）號: CN114672431B
• 公開（公告）日: 2023-06-20
• 發明（設計）人: 楊建明;申國明;王兆寶;張鵬;周杰;李貴童;張育榛;張艷萍
• 申請（專利權）人: 青島農業大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/22;A01P21/00;A01P1/00;C09K17/14;C05F11/08;C05G3/00;C05G3/60;C05G3/80;C12R1/07;C09K101/00
• 代理公司: 青島合創知識產權代理事務所(普通合伙) 37264
• 代理人: 王曉曉

本發明公開了一種防治青枯病的芽孢桿菌復合菌劑及其應用。所述芽孢桿菌復合菌劑是由混合菌種種子液擴培制成的，其中包括采用保藏編號為CGMCC?No.24342的貝萊斯芽孢桿菌LGT?1和CGMCC?No.24343的解淀粉芽孢桿菌ZJ?1制備而成的種子液，并且兩種種子液的體積比為1.0~2.0:1.0~2.0。所述芽孢桿菌復合菌劑用于煙草種植上，不僅能顯著降低青枯病病情指數，提高煙草多項農藝性狀，還能改善種植土壤的理化性質，促進煙株生長，因此具有廣闊的應用前景。

技術領域

本發明屬于微生物應用技術領域，具體涉及一種防治青枯病的芽孢桿菌復合菌劑及其應用。

背景技術

煙草青枯病是由青枯雷爾氏菌(Ralstonia?solanacearum)引起的細菌性病害，是典型的維管束病害，根、莖、葉都可發病。煙草青枯病是限制我國煙草生產的主要病害之一。青枯菌通過根部傷口、根尖或次生根進入煙草根部，最終定殖于木質部，繼而產生大量的胞外多糖堵塞維管束組織，造成葉片萎蔫、發黃壞死，直接影響著我國煙葉的品質和產量，并最終導致煙株死亡；青枯病還經常與煙草黑脛病、根結線蟲病等混合發生，嚴重時導致全田煙株枯死，給煙葉生產造成巨大的經濟損失。

目前防治青枯病多采用化學防治、土壤添加劑防治和傳統綜合防治。傳統綜合防治法受耕作方式和品種的限制，目前甚少高抗性能的煙草品種。化學藥劑防治常用廣譜殺菌劑，包括百菌清、多菌靈、可殺得等，雖能延緩發病，但防控效果不甚理想，并且長期使用化學藥劑會使病菌產生耐藥性，污染土壤及水資源，給人畜帶來危害。目前市場上尚未有針對煙草青枯病的高效低毒和無環境污染的化學藥劑。

鑒于化學防治和傳統綜合防治存在的不足，國內外利用有益微生物防治病蟲害逐漸成為研究熱點。芽孢桿菌是植物病害生防微生物的重要組成部分，能產生抗逆性很強的芽孢，具有較好的定殖性，并且產生的代謝產物對多種植物病害具有拮抗性。因此，開發“復合拮抗菌劑”充分發揮抗病增殖作用并實現防控技術簡化，為防治煙草青枯病提供生防資源。

發明內容

本發明的目的是提供一種防治青枯病的芽孢桿菌復合菌劑及其應用，所述芽孢桿菌復合菌劑能夠有效抑制煙草青枯病菌，改良種植土壤的基本理化性狀和促進植物的生長。

為實現上述目的，本發明采用技術方案為：

本發明提供了一種防治青枯病的芽孢桿菌復合菌劑，所述芽孢桿菌復合菌劑是由混合菌種種子液擴培制成的；所述混合菌種種子液包括貝萊斯芽孢桿菌種子液和解淀粉芽孢桿菌種子液。

進一步的，所述貝萊斯芽孢桿菌種子液和解淀粉芽孢桿菌種子液的體積比為1.0～2.0:1.0～2.0。

優選的，所述貝萊斯芽孢桿菌種子液和解淀粉芽孢桿菌種子液的體積比為1.0:2.0。

進一步的，所述貝萊斯芽孢桿菌種子液采用保藏編號為CGMCC?No.24342的貝萊斯芽孢桿菌LGT-1培養得到，其有效活菌數大于2.0×10¹⁰cfu/mL。

進一步的，所述解淀粉芽孢桿菌種子液采用保藏編號為CGMCC?No.24343的解淀粉芽孢桿菌ZJ-1培養得到，其有效活菌數大于2.0×10¹⁰cfu/mL。

進一步的，所述芽孢桿菌復合菌劑的制備包括以下步驟：

(1)將活化的貝萊斯芽孢桿菌和解淀粉芽孢桿菌分別接種在液體培養基中培養，制備貝萊斯芽孢桿菌種子液、解淀粉芽孢桿菌種子液；

(2)將步驟(1)的貝萊斯芽孢桿菌種子液、解淀粉芽孢桿菌種子液以1:100～150的體積比接入到發酵培養基中，培養得到貝萊斯芽孢桿菌發酵液、解淀粉芽孢桿菌發酵液；

(3)將步驟(2)中的貝萊斯芽孢桿菌發酵液、解淀粉芽孢桿菌發酵液以1.0～2.0:1.0～2.0的體積比進行混配，得到芽孢桿菌復合菌劑。