[發明專利]用于生產阿洛酮糖差向異構酶的培養基和培養方法及其應用

在審

• 申請號: 202210298159.0
• 申請日: 2022-03-24
• 公開（公告）號: CN114634902A
• 公開（公告）日: 2022-06-17
• 發明（設計）人: 佟毅;王琪;周衛強;李義;陳紹輝;王小艷;李凡
• 申請（專利權）人: 吉林中糧生化有限公司;中糧營養健康研究院有限公司
• 主分類號: C12N1/21
• 分類號: C12N1/21;C12N9/90;C12R1/125
• 代理公司: 北京潤平知識產權代理有限公司 11283
• 代理人: 劉依云

1.一種用于生產阿洛酮糖差向異構酶的培養基，其特征在于，所述培養基包括碳源、氮源、無機鹽和輔助因子；

其中，所述碳源包括葡萄糖和/或糖蜜；

所述氮源包括酵母提取物、玉米漿、蛋白胨和豆粕粉中的至少一種；

所述無機鹽用于提供P、K、S、Mn、Zn和Fe中的至少一種營養元素；

所述輔助因子包括硫胺素、核黃素和生物素中的至少一種。

2.根據權利要求1所述的培養基，其中，所述培養基中，由所述碳源提供的C元素為2-8/L；

和/或，所述培養基中，由所述氮源提供的N元素為3-12g/L；

和/或，所述培養基中，由所述無機鹽提供的P元素為1-5g/L、K元素為5-10g/L、S元素為0.1-0.8g/L、Mn元素為5×10^-4-2×10^-3g/L、Zn元素為4×10^-4-5×10^-3g/L、Fe元素為1×10^-3-2×10^-2g/L；

優選地，由所述碳源提供的C元素為3-7g/L；

優選地，所述培養基中，由所述氮源提供的N元素為4-10g/L；

優選地，所述培養基中，由所述無機鹽提供的P元素為2-4g/L、K元素為5-8g/L、S元素為0.2-0.6g/L、Mn元素為8×10^-4-1.8×10^-3g/L、Zn元素為4.5×10^-4-4.8×10^-3g/L、Fe元素為1.2×10^-3-1.5×10^-2g/L。

3.根據權利要求1或2所述的培養基，其中，所述碳源包括葡萄糖和糖蜜；

和/或，所述氮源包括酵母粉、玉米漿上清液、蛋白胨和黃豆豆粕粉中的至少一種；

優選地，所述葡萄糖和糖蜜的重量比為1:0.2-5；

更優選地，所述碳源中的葡萄糖含量是糖蜜的3倍以上。

4.根據權利要求1或2所述的培養基，其中，所述無機鹽包括常量元素無機鹽和/或微量元素無機鹽；

優選地，所述常量元素無機鹽用于提供P、K和S中的至少一種營養元素；

優選地，所述微量元素無機鹽用于提供Mn、Zn和Fe中的至少一種營養元素；

更優選地，所述常量元素無機鹽包括磷酸氫二鉀、磷酸二氫鉀、硫酸銨和磷酸氫二銨中的至少一種；

更優選地，所述微量元素無機鹽包括硫酸錳、氯化鋅、硫酸鐵和氯化鐵中的至少一種。

5.根據權利要求1-4中任意一項所述的培養基，其中，所述培養基的配方包括：

碳源：葡萄糖1-15g/L，糖蜜1-10g/L；

氮源：酵母粉5-35g/L，玉米漿上清液25-85g/L，蛋白胨1-10g/L，黃豆豆粕粉1-5g/L；

常量元素無機鹽：磷酸氫二鉀10-15g/L，磷酸二氫鉀1-5g/L，硫酸銨0.5-3g/L；

微量元素無機鹽：硫酸錳0.005-0.01g/L，氯化鋅0.001-0.01g/L，硫酸鐵0.005-0.05g/L；

輔助因子：硫胺素5×10^-6-1×10^-3g/L，核黃素1×10^-5-2×10^-4g/L，生物素1×10^-6-5×10^-4g/L；

余量為水。

6.一種生產阿洛酮糖差向異構酶的方法，其特征在于，所述方法包括將生產阿洛酮糖差向異構酶的工程菌接種至權利要求1-5中任意一項所述的培養基中進行發酵培養，以獲得含有阿洛酮糖差向異構酶的發酵液。

7.根據權利要求6所述的方法，其中，所述工程菌為枯草芽孢桿菌；

優選地，所述工程菌為基因工程改造的枯草芽孢桿菌，優選為基因工程改造的枯草芽孢桿菌1012；

更優選地，所述枯草芽孢桿菌中含有核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示的基因。