[發明專利]海參巖藻多糖及其制備方法和在制備防治由幽門螺桿菌引起的疾病的藥物和保健品中的應用

有效

• 申請號: 202210292356.1
• 申請日: 2022-03-24
• 公開（公告）號: CN114573727B
• 公開（公告）日: 2023-03-21
• 發明（設計）人: 繆錦來;曹峻菡;曲長鳳;秦玲;何英英;孫永軍;鞠文明
• 申請（專利權）人: 自然資源部第一海洋研究所
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00;A61K31/715;A61K35/616;A61P31/04;A23L33/125
• 代理公司: 青島合創知識產權代理事務所(普通合伙) 37264
• 代理人: 王曉曉

1.海參巖藻多糖或其藥學上可接受的鹽，其特征在于，所述海參巖藻多糖的制備方法包括以下步驟：

（1）向海參糖肽粉中加入乙酸鈉緩沖溶液、蛋白酶、EDTA溶液和半胱氨酸溶液，置于55℃-65 ℃下攪拌反應10 h-15 h，滅酶后離心，收集上清和沉淀；所述海參為象牙參、大烏爪參和美國肉參中的至少一種；

（2）將步驟（1）的沉淀加入蛋白酶進行二次酶解，收集上清；

（3）合并步驟（1）和步驟（2）的上清液，并加入十六烷基氯化吡啶溶液混合，室溫反應22h-24 h后，離心棄上清，將沉淀溶解于NaCl：乙醇混合溶液中，加入95%乙醇溶液，4℃放置22h-24 h，離心收集沉淀，將上清加入至終體積為60%的乙醇，4℃放置22 h-24 h，離心收集沉淀；

（4）利用梯度濃度的乙醇對步驟（3）的沉淀進行脫水處理，烘干得到固體粉末；

（5）將步驟（4）中的固體粉末溶于純水中透析脫鹽處理，透析完成后，溶液經旋蒸、凍干得到海參粗多糖；

（6）利用Q-Sepharose Fast Flow陰離子交換柱和Sephacryl S-300凝膠柱對所述海參粗多糖進行分離純化，根據繪制的洗脫曲線確定陰離子交換柱洗脫的NaCl洗脫濃度為0.2mol/L，收集合并洗脫液，濃縮后經透析凍干得到海參巖藻多糖；

將所述海參巖藻多糖用Sephacryl S-300凝膠柱進一步純化，以0.2 mol/L NH₄HCO₃為洗脫液，流速為0.3 mL/min收集洗脫液，根據洗脫曲線收集曲線峰尖部分，濃縮、減壓除氨、凍干得所述海參巖藻多糖。

2.根據權利要求1所述的海參巖藻多糖，其特征在于，所述海參巖藻多糖具體為：

。

3.根據權利要求2所述的海參巖藻多糖，其特征在于，所述海參巖藻多糖的分子量為10KDa -100 KDa；具有由-(1→3)-α-L-Fucp連接的巖藻糖組成的四糖重復單元；所述四糖重復單元為：→3)-α-L-Fucp-(1→3)-α-L-Fucp-(1→3)-α-L-Fucp-(1→3)-α-L-Fucp-(1→。

4.根據權利要求2所述的海參巖藻多糖，其特征在于，所述海參巖藻多糖中單糖組成包括巖藻糖和葡萄糖，其中巖藻糖的質量比為90%-100%。

5.根據權利要求1所述的海參巖藻多糖，其特征在于，所述步驟（1）中乙酸鈉緩沖溶液為0.1 mol/L，其與海參糖肽粉的液料比為3:1；所述蛋白酶為木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶、菠蘿蛋白酶的一種或多種。

6.根據權利要求1所述的海參巖藻多糖，其特征在于，所述步驟（5）中的透析袋的截留分子量為3500 Da-10000 Da。

7.權利要求1-6任一項所述的海參巖藻多糖在制備防治由幽門螺桿菌引起的疾病的藥物中的應用。

8.根據權利要求7所述的應用，其特征在于，所述海參巖藻多糖在體外具有抑制幽門螺桿菌的活性，且活性優于海帶巖藻多糖。

9.根據權利要求8所述的應用，其特征在于，象牙參巖藻多糖和大烏爪參巖藻多糖抑制幽門螺桿菌的有效劑量≥5 mg/mL，美國肉參巖藻多糖抑制幽門螺桿菌的有效劑量≥1.25mg/mL。

10.一種藥物，其特征在于，所述藥物用于抑制、清除或根除幽門螺桿菌，其包含象牙參巖藻多糖、大烏爪參巖藻多糖和美國肉參巖藻多糖中的至少一種，所述象牙參巖藻多糖和大烏爪參巖藻多糖抑制幽門螺桿菌的有效劑量≥5 mg/mL，美國肉參巖藻多糖抑制幽門螺桿菌的有效劑量≥1.25 mg/mL。