[發明專利]一種抗旱基因CrWRKY57及其在植物抗旱改良中的應用

有效

• 申請號: 202210284601.4
• 申請日: 2022-03-22
• 公開（公告）號: CN114591969B
• 公開（公告）日: 2023-08-15
• 發明（設計）人: 彭婷;熊欣婷;王敏;鐘灶發;程方婷;莫錦夏
• 申請（專利權）人: 贛南師范大學
• 主分類號: C12N15/29
• 分類號: C12N15/29;C07K14/415;C12N15/11;C12N15/82;C12N15/84;A01H5/00;A01H6/82;A01H6/78
• 代理公司: 北京高沃律師事務所 11569
• 代理人: 蘇士瑩

本發明提供了一種抗旱基因CrWRKY57及其在植物抗旱改良中的應用，涉及植物基因工程技術領域。本發明所述抗旱基因CrWRKY57的核苷酸序列SEQ?ID?NO.1所示，編碼的氨基酸序列如SEQ?ID?NO.2所示。本發明利用農遺傳轉化方法將所述基因在檸檬和煙草中超表達，在三湖紅橘中干涉表達，獲得的轉基因植株經生物學功能驗證，超表達植株抗旱性顯著提高，而干涉表達的植株抗旱性顯著降低，表明本發明所克隆的CrWRKY57基因具有提高抗旱性的功能。

技術領域

本發明屬于植物基因工程技術領域，具體涉及一種抗旱基因CrWRKY57及其在植物抗旱改良中的應用。

背景技術

干旱不僅嚴重限制了柑橘的栽培范圍，而且是制約柑橘產業發展的主要非生物因素。因此，培育具有抗旱性的柑橘新品種對柑橘產業持續、穩定和健康發展極為重要。生物技術的快速發展為植物育種提供了新的途徑，通過基因工程可以對作物進行定向的遺傳改良，已經在培育作物抗逆新品種(材料)中展現出重要的利用價值。發掘和鑒定抗逆基因是利用基因工程創制抗逆轉基因植株的前提和關鍵，但是目前對于抗旱基因的篩選量還很少，無法滿足科研和生產需要。

發明內容

有鑒于此，本發明的目的在于提供一種抗旱基因CrWRKY57及其在植物抗旱改良中的應用，為植物抗逆分子設計育種提供新的基因資源，為實施綠色農業、節水農業提供新的遺傳資源，該遺傳資源的開發利用有利于降低農業生產成本和實現環境友好。

為了實現上述發明目的，本發明提供以下技術方案：

本發明提供了一種抗旱基因CrWRKY57，所述抗旱基因CrWRKY57的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.1所示。

本發明還提供了上述抗旱基因CrWRKY57編碼的蛋白質。

優選的，所述蛋白質的氨基酸序列如SEQ?ID?NO.2所示。

本發明還提供了一種擴增上述抗旱基因CrWRKY57的引物對，包括上游引物和下游引物，所述上游引物的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.3所示，所述下游引物的核苷酸序列如?SEQID?NO.4所示。

本發明還提供了一種擴增上述抗旱基因CrWRKY57的方法，包括以下步驟：以三湖紅橘的cDNA為模板，利用上述引物對進行PCR擴增，得所述抗旱基因CrWRKY57；

所述PCR擴增的程序包括：94℃預變性5min；98℃變性30s，58℃退火30s，72℃延伸1min，35個循環；72℃延伸10min。

本發明還提供了上述抗旱基因CrWRKY57、上述蛋白質或利用上述方法擴增得到的抗旱基因CrWRKY57在提高植物抗旱性中的應用。

優選的，所述植物包括三湖紅橘、煙草和/或檸檬。

本發明還提供了一種超表達上述抗旱基因CrWRKY57的重組載體，所述重組載體的基礎載體包括pBI121載體，所述抗旱基因CrWRKY57插入所述基礎載體的XbaI和SmaI?位點之間。

本發明還提供了一種提高植物抗旱性的方法，包括以下步驟：在植物基因組中表達或超表達上述抗旱基因CrWRKY57。

優選的，所述超表達包括利用遺傳轉化的方法，將上述重組載體轉入植物的基因組中，得提高抗旱性的植物。