[發明專利]具有改進的特性的ω-羥化酶相關的融合多肽

在審

• 申請號: 202210284305.4
• 申請日: 2015-08-13
• 公開（公告）號: CN114605558A
• 公開（公告）日: 2022-06-10
• 發明（設計）人: B·朱;A·W·施爾摩;C·常
• 申請（專利權）人: 基因組股份公司
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C12N9/02;C12P7/6409;C12N1/21
• 代理公司: 中國貿促會專利商標事務所有限公司 11038
• 代理人: 張小勇

1.一種CYP153A-還原酶雜合融合多肽變體，其與SEQ ID NO:38具有至少90％序列同一性并且在選自由27、56、111、140、149、154、157、162、164、204、244、254、271、273、302、309、407、477、480、481、527、544、546、557、567、591、648、649、706、707、708、709、710、719、720、736和741組成的組的氨基酸位置處具有至少一個突變，其中所述CYP153A-還原酶雜合融合多肽變體催化脂肪酸轉化為ω-羥基化脂肪酸。

2.根據權利要求1所述的CYP153A-還原酶雜合融合多肽變體，其中所述突變選自由R27L、P56Q、F111A、S140N、P149G、P149R、V154G、S157R、V162C、A164N、G204V、A244R、R254G、E271D、P273M、T302M、N309S、N407G、P477G、I480G、G481I、D527E、D544N、P546G、E557W、E557R、E557R、E567S、E591Q、V648L、S649I、L706E、L706S、L706H、D707E、P708S、D709L、V710R、V710Q、V710C、R719W、D720V、A736V和N741G組成的組。

3.一種重組宿主細胞，其包含根據權利要求1或2所述的CYP153A-還原酶雜合融合多肽變體。

4.一種細胞培養物，其包含根據權利要求3所述的重組宿主細胞。

5.一種產生ω-羥基化脂肪酸的方法，所述方法包括：在包含碳源的發酵液中培養根據權利要求3所述的重組宿主細胞。

6.根據權利要求5所述的方法，其還包括分離所述ω-羥基化脂肪酸。

7.根據權利要求5所述的方法，其中所述ω-羥基化脂肪酸包括C₁₂、C₁₆和和C_16:1ω-羥基化脂肪酸中的一種或多種。

8.根據權利要求5所述的方法，其中所述重組宿主細胞還包含EC 3.1.2.-的外源性硫酯酶多肽。

9.根據權利要求8所述的方法，其中所述重組宿主細胞還包含EC 3.1.2.14的外源性硫酯酶多肽。

10.根據權利要求8或9所述的方法，其中所述重組宿主細胞產生ω-羥基化脂肪酸，所述ω-羥基化脂肪酸具有比由包含SEQ ID NO:38的相應CYP153A-還原酶雜合融合多肽的重組宿主細胞產生的ω-羥基化脂肪酸的效價大至少10％、大至少15％、大至少20％、大至少25％或大至少30％的效價。