[發(fā)明專利]一株黃瓜金黃桿菌及其在降解海藻渣中的應(yīng)用

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202210280128.2
• 申請(qǐng)日: 2022-03-21
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN114717145A
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-07-08
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 賈海江;韋建玉;黃崇峻;張紀(jì)利;歐清華;楊英杰;尤祥偉;李義強(qiáng)
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 廣西中煙工業(yè)有限責(zé)任公司
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;C05F17/20;C05G3/00;B09B3/60;C12R1/01
• 代理公司: 北京三聚陽(yáng)光知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11250
• 代理人: 李紅團(tuán)

本發(fā)明提供一株黃瓜金黃桿菌及其相應(yīng)產(chǎn)品和應(yīng)用。所述黃瓜金黃桿菌3T34的分類命名為黃瓜金黃桿菌(Chryseobacterium cucumeris)，該菌株于2020年5月20日保藏在中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，其保藏編號(hào)為CGMCC No.19790。該金黃桿菌不僅能高效降解海藻渣，而且含有能夠降解乙烯合成前體的ACC脫氨酶。該菌株不僅能為植物提供轉(zhuǎn)化降解海藻渣提供植物生長(zhǎng)所需營(yíng)養(yǎng)元素，并且在逆境條件下，能夠增強(qiáng)植物的耐受性和促進(jìn)植物的生長(zhǎng)。

發(fā)明領(lǐng)域：

本發(fā)明屬于微生物和微生物肥料領(lǐng)域，具體涉及一株黃瓜金黃桿菌及其在降解海藻渣和作為植物根際促生菌在微生物肥料中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

我國(guó)海洋海藻資源十分豐富，有經(jīng)濟(jì)價(jià)值的海藻有褐藻、紅藻、綠藻和少量藍(lán)藻等大型種類。迄今為止，海藻已在食品、海洋藥物、動(dòng)物飼料、有機(jī)肥料、化妝品及生物能源等領(lǐng)域和范圍體現(xiàn)出巨大的開(kāi)發(fā)潛力和經(jīng)濟(jì)價(jià)值。在海藻的加工利用過(guò)程中，由于現(xiàn)有工藝條件的限制，海藻中養(yǎng)分不能被完全提取出來(lái)，剩余的部分殘留在廢棄的海藻渣中。因此，這些海藻渣富含豐富的營(yíng)養(yǎng)，除含有部分水分外，還有海藻酸、甘露醇、甜菜堿、殼聚糖、多酚等，另外還包括海藻纖維、果膠、蛋白質(zhì)、木質(zhì)素等物質(zhì)。因此，如何將海藻渣進(jìn)一步加工利用，最大程度地發(fā)揮其價(jià)值，成為人們?nèi)找骊P(guān)心的問(wèn)題。本文以海藻酸提取后的廢渣為原料，采用微生物降解解的方法提取剩余營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和生產(chǎn)微生物菌劑，從而為海藻渣的廢物利用和植物生物刺激素在農(nóng)業(yè)中的應(yīng)用開(kāi)辟了一條新的途徑。

海藻裂解酶來(lái)源廣泛，種類多樣，已接近100種海藻酸鹽裂解酶從海洋和陸地細(xì)菌、海洋軟體動(dòng)物和藻類等不同物種中被分離、鑒定、克隆和純化。海藻酸裂解酶按照產(chǎn)酶位置可分為胞內(nèi)酶和胞外酶，按照酶切方式可分為內(nèi)切酶和外切酶。海洋細(xì)菌是海藻酸裂解酶最主要的來(lái)源，如海洋弧菌(Vibrio sp.)、假交替單胞菌屬(Pseudoalteromonas sp.)等從腐爛的海帶中分離的細(xì)菌。這些細(xì)菌限制了在農(nóng)業(yè)中的應(yīng)用發(fā)展。因此，從農(nóng)田土壤中篩選高效降解褐藻膠的新菌種，尋找適合海藻提取物生產(chǎn)的褐藻膠裂解酶，是開(kāi)發(fā)褐藻資源，探索其高值化利用新途徑的必然要求。

發(fā)明內(nèi)容

本研究從山東青島即墨農(nóng)場(chǎng)的土壤中篩選得到一株高產(chǎn)海藻酸裂解酶的黃瓜金黃桿菌3T34，該菌株產(chǎn)酶發(fā)酵時(shí)間短，轉(zhuǎn)化利用海藻渣能力強(qiáng)。通過(guò)基因組測(cè)序、轉(zhuǎn)錄組測(cè)序發(fā)現(xiàn)，該菌在高效降解海藻的同時(shí)，還能夠產(chǎn)生ACC脫氨酶提高植物逆境抗性。

一方面，本申請(qǐng)?zhí)峁┝艘恢挈S瓜金黃桿菌3T34，其特征在于：所述黃瓜金黃桿菌3T34的分類命名為黃瓜金黃桿菌(Chryseobacterium cucumeris),該菌株于2020年5月9日保藏在中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏地址：北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)，其保藏編號(hào)為CGMCC No.19790。

另一方面，本申請(qǐng)?zhí)峁┝松鲜龉辖瘘S桿菌3T34在降解海藻渣中的應(yīng)用。

另一方面，本申請(qǐng)?zhí)峁┝松鲜龉辖瘘S桿菌3T34在制備微生物肥料中的應(yīng)用。

另一方面，本申請(qǐng)?zhí)峁┝艘环N微生物菌劑，其包含上述瓜金黃桿菌。

另一方面，本申請(qǐng)?zhí)峁┝艘环N微生物肥料，其包含上述瓜金黃桿菌。

進(jìn)一步地，所述微生物肥料由上述瓜金黃桿菌發(fā)酵海藻渣制備而成。

進(jìn)一步地，所述發(fā)酵中干重海藻渣的加入量為培養(yǎng)基的2.5％w/v。

進(jìn)一步地，所述發(fā)酵所用培養(yǎng)基中菌液加入量為培養(yǎng)基的1％v/v。

進(jìn)一步地，所述發(fā)酵所用的培養(yǎng)基還包含磷酸二氫鉀、七水硫酸鎂、磷酸氫二鉀、無(wú)水氯化鈣、乙二胺四乙酸二鈉。

進(jìn)一步地，所述發(fā)酵過(guò)程中180rpm震蕩通氣。