[發(fā)明專利]一種與大白菜DW抗根腫病位點(diǎn)CRA8.1連鎖的分子標(biāo)記及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202210271774.2
• 申請(qǐng)日: 2022-03-18
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN114774569B
• 公開(kāi)（公告）日: 2023-07-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張椿雨;王燕燕;向賢裕;甘龍財(cái);陳鵬
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 華中農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): C12Q1/6895
• 分類號(hào): C12Q1/6895;C12Q1/686;C12N15/11
• 代理公司: 北京盛詢知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11901
• 代理人: 袁善民

本發(fā)明公開(kāi)了一種與大白菜DW抗根腫病位點(diǎn)CRA8.1連鎖的分子標(biāo)記及其應(yīng)用，涉及分子遺傳育種領(lǐng)域。所述分子標(biāo)記的核苷酸序列如SEQ?ID?NO：1所示。本發(fā)明通過(guò)有性雜交的常規(guī)育種途徑成功將大白菜DW的抗根腫病位點(diǎn)CRA8.1導(dǎo)入到不抗病甘藍(lán)型油菜品種ZS11和不抗病白菜型油菜品種黃籽沙遜中，并利用BSA測(cè)序結(jié)合生物信息學(xué)技術(shù)定位控制根腫病抗性的位點(diǎn)CRA8.1開(kāi)發(fā)出與該位點(diǎn)緊密連鎖的分子標(biāo)記A08?DW1，可以為培育抗根腫病的十字花科云薹屬作物提供新抗源以及為抗根腫病基因選育提供有效的分子標(biāo)記，并顯著提高抗性育種的效率。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及分子遺傳育種領(lǐng)域，特別是涉及一種與大白菜DW抗根腫病位點(diǎn)CRA8.1連鎖的分子標(biāo)記及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

根腫病是一種高度傳染性的土壤傳播疾病，專門(mén)危害蕓苔屬植物，它是由蕓苔屬根腫菌(Plasmodiophora?brassicae)引起的。大多數(shù)蕓薹屬植物，包括甘藍(lán)型油菜(Brassica?napus)、甘藍(lán)(Brassica?olerace)和白菜(Brassica?rapa)等，都能被根腫菌侵染，敏感植物在侵染后表現(xiàn)出根系腫脹癥狀，導(dǎo)致根系水分和養(yǎng)分輸送功能障礙。最終枯萎和死亡。近年來(lái)，該疾病在世界范圍內(nèi)迅速蔓延，造成十字花科作物和蔬菜嚴(yán)重減產(chǎn)。

目前為止培育和應(yīng)用抗根腫病品種是抵抗根腫病在世界范圍內(nèi)的快速傳播的最有效、最環(huán)保的方法。大多數(shù)根腫病抗性位點(diǎn)已在白菜(B.rapa，genome?AA,2n＝20)中發(fā)現(xiàn)，并已將抗病位點(diǎn)引入不抗病十字花科作物中，明顯改善其對(duì)根腫菌的抗性表型。事實(shí)上，對(duì)根腫病的抗性是一個(gè)相對(duì)的術(shù)語(yǔ)，因?yàn)樗拗骺梢詫?duì)從一個(gè)地區(qū)分離出來(lái)的病原體產(chǎn)生抗性，但同時(shí)又容易受到來(lái)自另一個(gè)地區(qū)的病原菌的影響，因?yàn)楦[病病原菌的遺傳背景和毒力水平各不相同。另外，目前農(nóng)業(yè)中使用的一些主要抗性位點(diǎn)提供了有效且高度特異性的抗性，但病原菌的效應(yīng)蛋白基因會(huì)積累突變，從而導(dǎo)致抗性的喪失。例如，在加拿大的阿爾伯塔省，在第一個(gè)CR品種商業(yè)化發(fā)布后僅四年，就發(fā)現(xiàn)了一種能夠克服抗性的“新的”蕓苔屬根腫菌病原菌類型?？垢[病油菜新品種華雙5R和華油雜62R在中國(guó)被廣泛利用，它們對(duì)PbZj，PbCd具有抗性，但對(duì)PbTc和PbXm沒(méi)有抗性。過(guò)去，人們根據(jù)一系列蕓薹屬植物寄主對(duì)特定病原菌的反應(yīng)建立了不同的分類體系。最廣泛使用的蕓苔屬根腫菌(Plasmodiophora?brassicaea)分類系統(tǒng)是Williams系統(tǒng)(Williams?1966)。根據(jù)Williams系統(tǒng)，4型是中國(guó)最常見(jiàn)的根腫菌類型。由于，Williams系統(tǒng)對(duì)于鑒定中國(guó)的根腫菌類型存在一定具有局限性，因此最近研究者又提出了一種新的根腫菌鑒別系統(tǒng)SCD(sininiticclubroot?differential?system)將中國(guó)的4號(hào)生理小種進(jìn)一步劃分為11個(gè)亞型(Pang?etal?2020)，這說(shuō)明Williams系統(tǒng)確定的中國(guó)4號(hào)生理小種實(shí)際上是由類型豐富的根腫菌組成，因此加速篩選針對(duì)抗不同根腫病病區(qū)的抗性資源，鑒定新的抗性基因，對(duì)中國(guó)根腫病抗病育種具有極其重要的意義。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種與大白菜DW抗根腫病位點(diǎn)CRA8.1連鎖的分子標(biāo)記及其應(yīng)用，以解決上述現(xiàn)有技術(shù)存在的問(wèn)題，本發(fā)明通過(guò)有性雜交的常規(guī)育種途徑成功將大白菜DW的抗根腫病位點(diǎn)CRA8.1導(dǎo)入到不抗病甘藍(lán)型油菜品種ZS11和不抗病白菜型油菜品種黃籽沙遜中，并利用BSA測(cè)序結(jié)合生物信息學(xué)技術(shù)定位控制根腫病抗性的位點(diǎn)CRA8.1開(kāi)發(fā)出與該位點(diǎn)緊密連鎖的分子標(biāo)記A08-DW1，可以為培育抗根腫病的十字花科云薹屬作物提供新抗源以及為抗根腫病基因選育提供有效的分子標(biāo)記，并顯著提高抗性育種的效率。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供了如下方案：

本發(fā)明提供一種與大白菜DW抗根腫病位點(diǎn)CRA8.1連鎖的分子標(biāo)記，所述分子標(biāo)記的核苷酸序列如SEQ?ID?NO：1所示。

進(jìn)一步地，所述分子標(biāo)記的引物對(duì)序列如SEQ?ID?NO：2和SEQ?ID?NO：3所示。

本發(fā)明還提供一種利用上述的分子標(biāo)記篩選抗根腫病植株的方法，包括以下步驟：