[發明專利]一種二丁口服液質量控制指標的確定方法

在審

• 申請號: 202210257297.4
• 申請日: 2022-03-16
• 公開（公告）號: CN116297997A
• 公開（公告）日: 2023-06-23
• 發明（設計）人: 康玉霞;王欣;崔小七;張鳳;李曉慶;丁佳麗
• 申請（專利權）人: 鄭州百瑞動物藥業有限公司
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/74;G01N30/90
• 代理公司: 鄭州大通專利商標代理有限公司 41111
• 代理人: 蔡少華

1.一種二丁口服液質量控制指標的確定方法，其特征在于，包括以下步驟：

1）二丁口服液性狀為紅棕色至棕褐色的液體、微苦，檢查相對密度不低于1.01、pH值為4.0~6.0，采用薄層色譜法對二丁口服液中紫花地丁和蒲公英、半邊蓮、板藍根進行定性鑒別；

2）配置對照品和不同批次的供試品溶液，采用高效液相色譜法測定口服液中主藥效成分含量；

3）根據高效液相色譜法測定結果確定二丁口服液的主藥效成分控制指標：每1mL二丁口服液中含秦皮乙素不得少于0.5mg、含咖啡酸不得少于50μg、含(R,S)-告依春不得少于10μg。

2.根據權利要求1所述的一種二丁口服液質量控制指標的確定方法，其特征在于，步驟1）具體步驟如下：

a、紫花地丁和蒲公英的鑒別：取二丁口服液1mL，加甲醇30mL，超聲處理30min，濾過，濾液蒸干，殘渣加熱水20mL使溶解，放冷，用乙酸乙酯振搖提取2次，每次20mL，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘渣加甲醇lmL使溶解，作為供試品溶液；另取秦皮乙素對照品、咖啡酸對照品，分別加甲醇制成每lmL含0.5mg的對照品溶液；再取紫花地丁、蒲公英陰性樣品按供試品的制備方法制成陰性對照溶液；吸取上述溶液各5μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸比例為5:3:1的混合溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置碘蒸氣中熏至斑點顯色清晰；供試品色譜中在與對照品色譜相應的位置上顯相同顏色的斑點，陰性對照無干擾；

b、半邊蓮的鑒別：取二丁口服液8mL，用氨試液調節pH=11，用三氯甲烷振搖提取2次，每次10mL，合并三氯甲烷液，蒸干，殘渣加甲醇1mL使溶解，作為供試品溶液；再取半邊蓮對照藥材2g，加水50mL，煎煮30min，離心，上清液濃縮至10mL，用氨試液調節pH=11，用三氯甲烷振搖提取2次，每次10mL，合并三氯甲烷液，蒸干，殘渣加甲醇1mL使溶解，作為對照品溶液；另取半邊蓮陰性樣品按供試品的制備方法制成陰性對照溶液；吸取上述溶液各5μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲酸比例為10:1的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外燈下檢視；供試品色譜中在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點，陰性對照無干擾；

步驟c、板藍根的鑒別：取二丁口服液10mL，三氯甲烷振搖提取3次，每次10mL，合并三氯甲烷液，蒸干，殘渣加甲醇0.5mL使溶解，作為供試品溶液；再取板藍根對照藥材1g，加水20mL，超聲30min，離心，上清液用三氯甲烷振搖提取3次，每次20mL，合并三氯甲烷液，蒸干，殘渣加甲醇0.5mL使溶解，作為對照品溶液；取(R,S)-告依春對照品，加甲醇制成每1mL含0.5mg的對照品溶液；另取板藍根陰性樣品按供試品的制備方法制成陰性對照溶液；吸取上述溶液各10μL，分別點于同一硅膠GF₂₅₄薄層板上，以石油醚-乙酸乙酯比例為1:1的混合溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置254nm紫外燈下檢視；供試品色譜中在與對照藥材色譜和對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點，陰性對照無干擾。

3.根據權利要求1所述的一種二丁口服液質量控制指標的確定方法，其特征在于，步驟2）具體步驟如下：

a、對照品溶液的制備：取秦皮乙素對照品、咖啡酸對照品和(R,S)-告依春對照品，加甲醇分別制成每1mL含秦皮乙素0.2～0.3mg、咖啡酸15～20μg、(R,S)-告依春2～5μg的對照品溶液；

b、供試品溶液的制備：量取二丁口服液5mL，置150mL錐形瓶中，加入甲醇20mL，稱定重量，超聲處理30min，放冷，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液；

c、測定：吸取對照品溶液和供試品溶液各10μL，注入液相色譜儀，色譜條件：用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱，柱溫30℃，檢測波長240nm；流動相以乙腈為A相、0.1%磷酸溶液為B相，洗脫程序為：0~20min，2%A；20~40min，2%~20%A；理論板數按秦皮乙素、咖啡酸和(R,S)-告依春各峰計算且均不低于3000，測定。