[發(fā)明專利]一種產(chǎn)山奈酚的功能菌群及其制備和應用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202210251057.3
• 申請日: 2022-03-15
• 公開（公告）號: CN114456988B
• 公開（公告）日: 2023-06-13
• 發(fā)明（設計）人: 劉學端;張雙飛;梁伊麗;孫崇然;周瑾;張國慶
• 申請（專利權）人: 中南大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/14;C12P17/06;C12R1/07;C12R1/41;C12R1/77
• 代理公司: 長沙市融智專利事務所(普通合伙) 43114
• 代理人: 袁靖

1.一種產(chǎn)山奈酚的功能菌群，其特征在于，包括貝萊斯芽孢桿菌（Bacillus?velezensis）、華中根瘤菌（Rhizobium?mesosinicum）和腐皮鐮刀菌（Fusarium?solani）；所述的貝萊斯芽孢桿菌為貝萊斯芽孢桿菌DSM?28326，所述的華中根瘤菌為華中根瘤菌LMG24135，所述的腐皮鐮刀菌為腐皮鐮刀菌ATCC?36031。

2.根據(jù)權利要求1所述的功能菌群，其特征在于，先將貝萊斯芽孢桿菌、華中根瘤菌和腐皮鐮刀菌單獨培養(yǎng)，當三者均達到對數(shù)生長期時，把貝萊斯芽孢桿菌、華中根瘤菌均按照5-10%的接種量接種到腐皮鐮刀菌的發(fā)酵液中，最后再培養(yǎng)構建共發(fā)酵體系。

3.權利要求1或2所述的功能菌群的制備方法，其特征在于，先將貝萊斯芽孢桿菌、華中根瘤菌和腐皮鐮刀菌單獨培養(yǎng)，當三者均達到對數(shù)生長期時，把貝萊斯芽孢桿菌、華中根瘤菌均按照5-10%的接種量接種到含有腐皮鐮刀菌的發(fā)酵體系中。

4.根據(jù)權利要求3所述的制備方法，其特征在于，發(fā)酵體系中腐皮鐮刀菌稱干重達到2-3g/100mL，用于接種貝萊斯芽孢桿菌和華中根瘤菌。

5.根據(jù)權利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述貝萊斯芽孢桿菌、華中根瘤菌和腐皮鐮刀菌的種子培養(yǎng)基均為添加0.1-0.2?g/L氯霉素的馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基。

6.根據(jù)權利要求3所述的制備方法，其特征在于，將貝萊斯芽孢桿菌、華中根瘤菌分別接種到培養(yǎng)基中培養(yǎng)獲得種子液，培養(yǎng)條件均為：溫度為25-30℃，轉速為160-180rpm，初始pH值為6.5~7.5，培養(yǎng)時間為1~2天；腐皮鐮刀菌前期單獨培養(yǎng)條件為溫度為25-30℃，轉速為140-160rpm，初始pH值為6.5~7.0，培養(yǎng)時間為2~4天。

7.根據(jù)權利要求3所述的制備方法，其特征在于，在共發(fā)酵之前，貝萊斯芽孢桿菌、華中根瘤菌的種子液需要經(jīng)過離心去掉上清液，加入無菌培養(yǎng)基，重懸后，再次離心，重復洗滌3-6次，待洗滌完成后，收集到的菌體用無菌培養(yǎng)基稀釋成菌懸液，再進行接種。

8.權利要求1或2所述的產(chǎn)山奈酚的功能菌群的應用方法，其特征在于，將所述的功能菌群發(fā)酵產(chǎn)山奈酚。

9.權利要求8所述的產(chǎn)山奈酚的功能菌群的應用方法，其特征在于，發(fā)酵培養(yǎng)條件為：溫度為25-30℃，轉速為160-180rpm，初始pH值為6.5~8.0，培養(yǎng)時間為2~4天，發(fā)酵培養(yǎng)基為添加0.1-0.2?g/L氯霉素的馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基。

10.根據(jù)權利要求8或9所述的應用方法，其特征在于，菌株單獨培養(yǎng)和整個發(fā)酵過程中，均需要嚴格遮光。